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白蛉檢測

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發(fā)布時間：2025-07-21 23:49:09 更新時間：2025-07-20 23:49:09

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作者：中科光析科學技術(shù)研究所檢測中心

白蛉檢測：識別、防控與標準

白蛉（Sand Fly），作為一類小型吸血雙翅目昆蟲，是多種重要人畜共患疾病（如黑熱病、巴爾通體病、白蛉熱等）的主要傳播媒介，尤其在熱帶和亞熱帶地區(qū)具有顯著的公共衛(wèi)生意義。因其體型微?。w長通常僅1.5-3.5mm）、活動隱蔽（多在黃昏及夜間活動），且其孳生地常與人類居住環(huán)境重疊，對白蛉種群密度、分布范圍、季節(jié)消長及病原攜帶狀況進行科學、系統(tǒng)的監(jiān)測至關(guān)重要。有效的白蛉檢測不僅是評估蟲媒疾病傳播風險的基礎(chǔ)，更是制定和實施精準防控策略的核心依據(jù)，對于降低相關(guān)疾病負擔、保障人群健康具有不可替代的作用。

核心檢測項目

白蛉檢測工作通常圍繞以下幾個核心項目展開：

種群密度監(jiān)測： 評估特定區(qū)域、特定時間段內(nèi)白蛉成蟲的數(shù)量水平，常用單位如只/燈/夜、只/誘捕器/小時等。
種類鑒定： 準確識別捕獲白蛉的種屬，確定是否存在本地主要的疾病媒介種（如中華白蛉、長管白蛉等）。不同種類在傳病能力、生態(tài)習性上差異顯著。
季節(jié)消長動態(tài)： 監(jiān)測白蛉種群數(shù)量隨季節(jié)變化的規(guī)律，確定其活動高峰期及越冬情況。
空間分布調(diào)查： 了解白蛉在不同生境（如居民區(qū)、畜舍、洞穴、荒漠地帶等）的分布特點及聚集區(qū)域。
病原體攜帶檢測： 最關(guān)鍵的項目之一，檢測白蛉體內(nèi)是否攜帶利什曼原蟲、白蛉熱病毒、巴爾通體等病原體，評估其實際傳播風險。
生態(tài)習性觀察： 包括吸血習性（人血/動物血）、活動規(guī)律（時間、范圍）、孳生地偏好等。

主要檢測儀器與工具

白蛉的監(jiān)測依賴于一系列專門的設(shè)備與工具：

誘捕裝置：
- CDC 光誘捕器： 最常用設(shè)備，利用白蛉的趨光性，通過紫外燈或白光燈誘捕，常結(jié)合風扇吸入裝置。
- 粘捕法工具： 如粘蛉紙（涂有粘膠的紙張或卡片），懸掛于白蛉可能停落的場所（墻壁、門窗、洞穴口等）。
- 人帳誘捕法： 一種經(jīng)典的“人誘法”，操作者坐于特制蚊帳中暴露小腿，利用吸蚊器或電動吸蚊器捕獲前來吸血的白蛉。
- 掃網(wǎng)法工具： 適用于植被或洞穴等生境，使用昆蟲掃網(wǎng)進行揮掃捕捉。
樣本保存與處理工具： 指形管、離心管、冷凍保存管、干燥器、乙醚或乙醇、移液器、體視顯微鏡載玻片等。
形態(tài)學鑒定設(shè)備：
- 體視顯微鏡： 必備基礎(chǔ)設(shè)備，用于觀察白蛉外部形態(tài)特征（如口器、觸角、翅脈、受精囊/外生殖器結(jié)構(gòu)）進行種類鑒定。
分子生物學檢測設(shè)備：
- PCR 儀： 用于擴增白蛉體內(nèi)病原體（如利什曼原蟲 kDNA）的特異性基因片段或進行白蛉種類分子鑒定。
- 核酸提取設(shè)備/試劑盒： 從單只或成組白蛉中提取總DNA或RNA。
- 電泳系統(tǒng)： 分析PCR產(chǎn)物。
- 測序儀： 對PCR產(chǎn)物進行測序以確認病原體種類或進行白蛉分子系統(tǒng)學分析。
試劑： DNA/RNA提取試劑、PCR預混液、引物、核酸染料、測序試劑等。

常用檢測方法

白蛉檢測方法主要包括野外采集、實驗室鑒定與病原檢測：

野外采集方法：
- 燈誘法： 在監(jiān)測點懸掛CDC誘蚊燈（通常離地1.5米左右），日落后開啟至次日清晨關(guān)閉收集。
- 人帳誘捕法： 在黃昏后白蛉活動高峰時段，操作者在固定蚊帳內(nèi)暴露小腿一定時間（如1小時），用吸蚊器或電動吸蚊器捕捉停落吸血的白蛉。
- 棲息地粘捕法： 在室內(nèi)墻面、室外畜舍墻壁、洞穴內(nèi)壁等白蛉白天可能棲息的地方懸掛粘蛉紙，定期（如24小時）回收。
- 揮網(wǎng)法： 在洞穴、巖石縫隙、灌木叢等潛在孳生地或棲息地用昆蟲網(wǎng)進行揮掃捕捉。
- 畜誘法： 在牛棚、羊圈等畜舍內(nèi)放置粘蛉紙或使用吸蚊器捕捉。
實驗室鑒定方法：
- 形態(tài)學鑒定： 在體視顯微鏡下，根據(jù)《中國白蛉志》等權(quán)威分類學專著描述的形態(tài)特征（重點觀察口甲、咽甲、受精囊/雄蛉外生殖器結(jié)構(gòu)、翅脈等）進行種類鑒定。這是最基礎(chǔ)也是最重要的方法。
- 分子生物學鑒定： 提取白蛉DNA，對特定基因（如細胞色素C氧化酶亞基I - COI）進行PCR擴增和測序，利用序列比對進行種類確認，尤其適用于形態(tài)特征難以區(qū)分或殘損標本。
病原體檢測方法：
- 顯微鏡檢法： 解剖白蛉消化道（前胃、中腸），制作壓片，在光學顯微鏡下直接觀察利什曼原蟲前鞭毛體。靈敏度相對較低。
- 分子生物學檢測：
  - PCR/RT-PCR： 從單只或成組（Pooling）白蛉提取DNA/RNA，設(shè)計針對目標病原體（如利什曼原蟲kDNA minicircle、白蛉熱病毒特異基因片段）的特異性引物進行PCR擴增，通過凝膠電泳或熒光定量PCR檢測擴增產(chǎn)物。靈敏度、特異性高，是目前的主流方法。
  - LAMP（環(huán)介導等溫擴增）： 適用于現(xiàn)場快速檢測，無需復雜儀器。
  - 測序分析： 對PCR陽性產(chǎn)物進行測序，與數(shù)據(jù)庫比對確認病原體種/株型。
- 病原體分離培養(yǎng)： 將可疑陽性白蛉研磨液接種到適宜的培養(yǎng)基（如NNN培養(yǎng)基用于利什曼原蟲）或細胞系進行病原體分離培養(yǎng)，是“金標準”但耗時長、成功率受多種因素影響。