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血小板貯存性能檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-08-04 00:05:46 更新時(shí)間：2025-08-03 00:05:47

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

血小板貯存性能檢測(cè)

血小板輸注是臨床治療血小板減少或功能障礙所致出血性疾病的重要手段。然而，采集后的血小板在體外貯存期間，其生理生化特性和功能會(huì)隨時(shí)間推移而發(fā)生一系列變化，即“血小板貯存損傷”。這種損傷會(huì)嚴(yán)重影響輸注后的體內(nèi)存活率和止血效果。因此，對(duì)血小板制品在貯存過(guò)程中的性能進(jìn)行系統(tǒng)、規(guī)范的檢測(cè)至關(guān)重要，這直接關(guān)系到輸血的安全性和有效性。血小板貯存性能檢測(cè)通過(guò)評(píng)估其在規(guī)定貯存條件下（通常為22±2℃，持續(xù)水平震蕩）的質(zhì)量變化，確保在有效期內(nèi)（通常為5天）的血小板制品仍能滿足臨床輸注的要求，最大限度地保障患者受益。

主要檢測(cè)項(xiàng)目

血小板貯存性能評(píng)價(jià)涉及多個(gè)維度的指標(biāo)，核心檢測(cè)項(xiàng)目包括：

1. 理化特性：

pH值： 貯存過(guò)程中pH下降是代謝活躍和乳酸積累的標(biāo)志，pH低于6.8通常提示血小板功能嚴(yán)重受損。
血小板計(jì)數(shù)(Platelet Count, PLT)： 監(jiān)測(cè)貯存期間血小板數(shù)量的變化。
平均血小板體積(Mean Platelet Volume, MPV)： 反映血小板大小變化，與活化狀態(tài)相關(guān)。
形態(tài)評(píng)分(Swelling Score)： 通過(guò)顯微鏡觀察碟形、球形或樹(shù)突狀血小板比例，評(píng)估形態(tài)變化。
溶解率： 測(cè)定貯存后上清液中乳酸脫氫酶(LDH)或鉀離子(K+)濃度，反映血小板溶解破壞程度。
葡萄糖/乳酸濃度： 反映血小板代謝活性。
滲透壓抵抗： 評(píng)估血小板膜的完整性。

2. 功能與活化狀態(tài)：

CD62P (P-選擇素)表達(dá)率： 通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血小板表面P-選擇素的表達(dá)，是最常用的血小板活化標(biāo)志物。貯存中活化血小板比例上升。
膜聯(lián)蛋白V (Annexin V)結(jié)合： 檢測(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸(PS)，反映血小板凋亡狀態(tài)。
低滲休克反應(yīng)(Hypotonic Shock Response, HSR)： 評(píng)估血小板膜的功能完整性及其恢復(fù)能力。
聚集功能： 使用聚集儀(如光學(xué)或阻抗法)檢測(cè)血小板對(duì)ADP、膠原、瑞斯托霉素等誘導(dǎo)劑的聚集反應(yīng)能力。貯存后聚集能力下降。
凝血酶生成能力： 評(píng)估血小板在凝血瀑布反應(yīng)中的促凝活性。

3. 貯存環(huán)境監(jiān)測(cè)：

溫度： 持續(xù)監(jiān)測(cè)并記錄貯存設(shè)備的溫度，確保在22±2℃范圍內(nèi)。
震蕩： 確認(rèn)血小板保存箱/振蕩器是否持續(xù)、均勻、水平震蕩。
血袋完整性： 定期檢查有無(wú)破損、漏液。

主要檢測(cè)儀器

血小板貯存性能檢測(cè)依賴于多種專業(yè)儀器：

血細(xì)胞分析儀： 用于快速、準(zhǔn)確地測(cè)定血小板計(jì)數(shù)(PLT)、平均血小板體積(MPV)等。
血?dú)夥治鰞x/便攜式pH計(jì)： 專門(mén)用于精確測(cè)量血小板濃縮液樣本的pH值。
流式細(xì)胞儀(Flow Cytometer)： 檢測(cè)血小板活化標(biāo)志物（CD62P, CD42b, CD61等）、凋亡標(biāo)志物（Annexin V）以及血小板微粒(PMPs)的金標(biāo)準(zhǔn)儀器。
血小板聚集儀(Platelet Aggregometer)： 包括光學(xué)比濁法或阻抗法，用于評(píng)估血小板聚集功能。
生化分析儀： 測(cè)定上清液中的葡萄糖、乳酸、LDH、鉀離子等代謝物濃度。
分光光度計(jì)： 用于比色法測(cè)定某些代謝產(chǎn)物（如LDH）。
光學(xué)顯微鏡： 進(jìn)行血小板形態(tài)學(xué)觀察和評(píng)分。
溫度記錄儀/數(shù)據(jù)記錄器： 連續(xù)監(jiān)測(cè)并記錄血小板貯存環(huán)境的溫度。
滲透壓計(jì)： 用于滲透壓抵抗試驗(yàn)。

常用檢測(cè)方法

檢測(cè)需在無(wú)菌條件下取樣，并在取樣后盡快完成：

pH值測(cè)定： 使用血?dú)夥治鰞x或?qū)Ｓ帽銛y式pH計(jì)直接測(cè)量袋內(nèi)或取樣后的血小板濃縮液。
血細(xì)胞計(jì)數(shù)與形態(tài)： 血細(xì)胞分析儀自動(dòng)計(jì)數(shù)；形態(tài)評(píng)分需由經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員在顯微鏡下根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)圖譜進(jìn)行判讀。
流式細(xì)胞術(shù)：
- 取適量血小板樣本，用緩沖液洗滌或稀釋。
- 加入熒光標(biāo)記的特異性抗體（如FITC-CD62P, PE-CD42b/61）孵育。
- 固定（可選）后上機(jī)分析，圈定血小板群體（通常根據(jù)前向散射FSC和側(cè)向散射SSC特性，或結(jié)合CD42b/CD61陽(yáng)性），計(jì)算目標(biāo)標(biāo)志物的陽(yáng)性率或平均熒光強(qiáng)度(MFI)。
低滲休克反應(yīng)(HSR)： 將血小板樣本分別加入等滲和低滲緩沖液，混合后立即在特定波長(zhǎng)（如540nm）測(cè)定吸光度(A0)，37℃孵育10分鐘后再測(cè)吸光度(A10)，計(jì)算溶脹恢復(fù)率((A10低滲 - A10等滲) / A0等滲) * 100%)。
血小板聚集功能： 富含血小板血漿(PRP)法或全血法。加入誘導(dǎo)劑（如ADP, 膠原）后，儀器實(shí)時(shí)記錄透光率或電阻變化曲線，計(jì)算最大聚集率(MA)等參數(shù)。
溶解率測(cè)定： 離心分離上清液，用生化分析儀測(cè)定LDH活性或鉀離子濃度，與新鮮血小板或標(biāo)準(zhǔn)品比較計(jì)算。
葡萄糖/乳酸測(cè)定： 離心取上清液，用生化分析儀或?qū)Ｓ迷噭┖袡z測(cè)濃度。

相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

血小板貯存性能檢測(cè)需遵循國(guó)內(nèi)外權(quán)威標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)范：

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：
- 中國(guó)：《全血及成分血質(zhì)量要求》(GB 18469-2012)：對(duì)單采血小板和濃縮血小板的貯存期末質(zhì)量指標(biāo)（如pH、血小板含量、紅細(xì)胞/白細(xì)胞混入量）有明確要求。
- 中國(guó)：《血小板貯存與輸注指南》(WS/T 400-2012)：提供了更詳細(xì)的檢測(cè)方法和質(zhì)量評(píng)價(jià)指導(dǎo)。
行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)/指南：
- 美國(guó)血庫(kù)協(xié)會(huì)(AABB)《血液制品標(biāo)準(zhǔn)》：第31版及后續(xù)版本對(duì)血小板制品的采集、檢測(cè)、貯存、標(biāo)簽和運(yùn)輸有全面規(guī)定，是國(guó)際廣泛認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)。其對(duì)血小板質(zhì)量的要求（如pH下限、細(xì)菌檢測(cè)）具有重要參考價(jià)值。
- 歐洲委員會(huì)(EDQM)《血液制品指南》：對(duì)血小板制品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法有詳細(xì)規(guī)定。
- 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)：如ISO 15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力要求》確保檢測(cè)過(guò)程的標(biāo)準(zhǔn)化和結(jié)果可靠性。
藥典標(biāo)準(zhǔn)： 如《中華人民共和國(guó)藥典》相關(guān)章節(jié)可能包含生物制品（包括血液制品）的質(zhì)量控制要求。

這些標(biāo)準(zhǔn)通常規(guī)定了關(guān)鍵質(zhì)量指標(biāo)（如貯存期末pH值必須≥6.4或≥6.2，CD62P陽(yáng)性率有一定限制，白膜層制備的濃縮血小板需監(jiān)測(cè)紅細(xì)胞混入量等），以及相應(yīng)的檢測(cè)頻率、取樣方法和可接受范圍。

總之，系統(tǒng)、規(guī)范的血小板貯存性能檢測(cè)是保障血小板制品質(zhì)量和輸血安全的核心環(huán)節(jié)。通過(guò)綜合運(yùn)用多種檢測(cè)項(xiàng)目、精密儀器和標(biāo)準(zhǔn)方法，并嚴(yán)格遵循國(guó)家及國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，血站和輸血機(jī)構(gòu)能夠有效監(jiān)控血小板在貯存期的質(zhì)量變化，為臨床提供安全、有效的血小板制品，最終保障患者的生命健康。