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發(fā)布時間：2025-07-26 20:37:04 更新時間：2025-07-25 20:37:05

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作者：中科光析科學技術(shù)研究所檢測中心

磺胺類抗生素檢測：方法與重要性

磺胺類藥物（Sulfonamides, SAs）是一類人工合成的廣譜抗菌藥，曾廣泛應(yīng)用于人類醫(yī)療和畜牧養(yǎng)殖業(yè)，用于預(yù)防和治療細菌感染性疾病。然而，磺胺類藥物的不合理使用可能導(dǎo)致其在動物源性食品（如肉、蛋、奶、水產(chǎn)品）及環(huán)境中殘留，并通過食物鏈最終影響人類健康，主要表現(xiàn)為過敏反應(yīng)、細菌耐藥性增強以及潛在的致癌風險。因此，建立準確、靈敏、高效的磺胺類抗生素殘留檢測方法至關(guān)重要。

主要檢測方法

目前，針對磺胺類藥物的殘留檢測，主要采用以下幾種技術(shù)路線：

1. 微生物抑制法 (Microbiological Inhibition Tests)

這是傳統(tǒng)的初篩方法，原理是利用特定敏感菌株（如枯草芽孢桿菌）的生長受到殘留磺胺抑制的程度來判斷樣品中是否存在抗菌藥物殘留。該方法操作簡便、成本低廉，適用于大批量樣品的快速初篩。但其特異性差，無法區(qū)分具體的磺胺種類，靈敏度相對較低，且易受樣品基質(zhì)干擾，主要用于現(xiàn)場快速篩查。

2. 免疫分析法 (Immunoassays)

利用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理進行檢測，主要包括：

酶聯(lián)免疫吸附測定法 (ELISA)：是目前應(yīng)用最廣泛的快速檢測方法之一。將磺胺類抗原或抗體固定在微孔板上，加入樣品和酶標物進行競爭或夾心反應(yīng)，通過酶催化底物顯色進行定量或半定量分析。ELISA 具有靈敏度高、特異性較好、通量高、操作相對簡便、無需復(fù)雜前處理等優(yōu)點，特別適合大批量樣品的日常監(jiān)控和現(xiàn)場快速檢測。
膠體金免疫層析法：試紙條形式，結(jié)果肉眼可視（出現(xiàn)或消失條帶）。操作極其簡便快速（通常幾分鐘出結(jié)果），無需儀器，適用于現(xiàn)場即時檢測(POCT)。但其通常為定性或半定量，靈敏度低于ELISA。

3. 色譜分析法 (Chromatography)

這是確認和精確定量的主要手段，常與質(zhì)譜聯(lián)用。

高效液相色譜法 (HPLC)：
- HPLC-UV/VIS：利用磺胺類藥物在紫外或可見光區(qū)的特征吸收進行檢測。該方法專屬性優(yōu)于微生物法，成本低于質(zhì)譜，是實驗室常用的定量方法。但對復(fù)雜基質(zhì)樣品，可能存在干擾。
- HPLC-FLD：部分磺胺或其衍生物具有熒光特性，可利用熒光檢測器進行檢測，選擇性更高，靈敏度通常優(yōu)于UV。
液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 (LC-MS/MS)：當前磺胺多殘留檢測和確證的“金標準”。LC實現(xiàn)復(fù)雜基質(zhì)中不同磺胺單體的分離，MS/MS通過選擇母離子和特征子離子進行高選擇性、高靈敏度的定性和定量分析。該方法能夠同時檢測數(shù)十種磺胺類藥物及其代謝物，靈敏度可達 ng/g (ppb) 甚至 pg/g (ppt) 水平，抗干擾能力強，結(jié)果準確可靠，是法規(guī)實驗室進行確證和仲裁的首選方法。

檢測流程要點

無論采用哪種檢測方法，通常包含以下關(guān)鍵步驟：

樣品前處理：至關(guān)重要的一步。
- 提取：用合適的溶劑（如乙腈、酸化乙腈、緩沖溶液等）將目標磺胺從樣品基質(zhì)（肌肉、肝臟、蜂蜜、牛奶、飼料、水等）中溶解分離出來。
- 凈化：去除共提取的脂肪、蛋白質(zhì)、色素等干擾物質(zhì)。常用方法包括液液萃取(LLE)、固相萃取(SPE, 常用C18、HLB、MCX等填料)、QuEChERS法等。良好的凈化是保證后續(xù)分析準確性和儀器穩(wěn)定性的關(guān)鍵。
分析檢測：使用選定的儀器方法（ELISA讀數(shù)儀、HPLC、LC-MS/MS等）對凈化后的樣品進行測定。
數(shù)據(jù)處理與報告：根據(jù)標準曲線計算樣品中磺胺殘留量，并與相關(guān)限量標準（如中國GB 31650, 歐盟EC No 37/2010等）進行比較判定。

方法比較與選擇

方法	優(yōu)點	缺點	主要用途
微生物抑制法	快速、簡便、低成本、高通量（初篩）	靈敏度較低、特異性差、無法定量和區(qū)分種類	大規(guī)模初篩
ELISA	靈敏度高、特異性較好、高通量、操作相對簡便、成本適中	存在交叉反應(yīng)、單次檢測種類有限（通常為某一類或幾種）、定量范圍有限、需配套儀器	日常監(jiān)控、快速定量/半定量篩查
膠體金免疫層析	最快（幾分鐘）、最簡單、無需儀器、現(xiàn)場即時檢測	通常為定性/半定量、靈敏度低于ELISA、假陽/陰性風險略高	現(xiàn)場快速定性篩查
HPLC-UV/FLD	可定量、可區(qū)分部分磺胺、成本低于質(zhì)譜	靈敏度有限（尤其UV）、對復(fù)雜基質(zhì)抗干擾能力弱、前處理要求高	實驗室常規(guī)定量（對靈敏度要求不高時）
LC-MS/MS	高靈敏度、高特異性、可多殘留同時檢測（數(shù)十種）、確證能力強、結(jié)果準確可靠	儀器昂貴、操作維護復(fù)雜、對人員要求高、運行成本高、前處理要求嚴格	確證分析、仲裁、多殘留監(jiān)控、痕量分析

應(yīng)用場景與趨勢

磺胺檢測廣泛應(yīng)用于：

食品安全監(jiān)管：畜禽產(chǎn)品（豬、牛、羊、禽肉、內(nèi)臟）、蛋、奶、蜂蜜、水產(chǎn)品中殘留監(jiān)控。
養(yǎng)殖業(yè)自控：飼料、飲用水、動物用藥后組織/體液監(jiān)測，確保休藥期執(zhí)行。
環(huán)境監(jiān)測：水體（養(yǎng)殖廢水、地表水）、土壤中磺胺類污染物的檢測。

發(fā)展趨勢：

向更快速、更高通量、更低成本的現(xiàn)場/在線檢測技術(shù)發(fā)展（如改進的免疫層析、生物傳感器）。
LC-MS/MS技術(shù)持續(xù)優(yōu)化，追求更高的靈敏度、更快的分析速度和更強的多殘留同時檢測能力。
前處理方法追求更高效、更環(huán)保、更自動化（如在線SPE、QuEChERS自動化）。
對磺胺代謝物和結(jié)合態(tài)殘留的關(guān)注日益增加。

總結(jié)

磺胺類抗生素的檢測是保障食品安全、環(huán)境安全和公共衛(wèi)生的重要手段。從初篩到確證，多種檢測方法并存并相互補充。選擇合適的方法需綜合考慮檢測目的（篩查or確證）、所需靈敏度、特異性、分析通量、樣品基質(zhì)、成本預(yù)算以及實驗室條件等因素。免疫分析法（尤其是ELISA）在快速篩查領(lǐng)域占據(jù)主導(dǎo)地位，而LC-MS/MS則是多殘留精準確證和痕量分析的金標準。技術(shù)的不斷進步旨在滿足日益嚴格的監(jiān)管要求和更高效靈敏的檢測需求。

關(guān)鍵提醒：所有檢測都應(yīng)在符合資質(zhì)的實驗室，由經(jīng)過培訓的人員，嚴格按照標準操作程序(SOP)和相關(guān)法規(guī)（如GB, ISO, FDA, EU等）進行，以確保結(jié)果的準確性和可靠性。