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嗜熱鏈球菌檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-19 19:27:20 更新時(shí)間：2025-07-18 19:27:20

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

嗜熱鏈球菌檢測(cè)概述

嗜熱鏈球菌（Streptococcus thermophilus）是一種廣泛應(yīng)用于乳制品發(fā)酵的革蘭氏陽(yáng)性菌，尤其在酸奶、奶酪等產(chǎn)品的生產(chǎn)中扮演關(guān)鍵角色。該菌種能高效轉(zhuǎn)化乳糖為乳酸，優(yōu)化產(chǎn)品質(zhì)構(gòu)和風(fēng)味，并具備潛在的益生功能。然而，在食品生產(chǎn)和質(zhì)量監(jiān)控過(guò)程中，準(zhǔn)確檢測(cè)嗜熱鏈球菌的活菌數(shù)量、純度及代謝活性至關(guān)重要。這不僅關(guān)系到產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性，還涉及食品安全標(biāo)準(zhǔn)合規(guī)性、益生功效驗(yàn)證及生產(chǎn)工藝優(yōu)化。隨著乳制品行業(yè)的發(fā)展，建立標(biāo)準(zhǔn)化、高效率的檢測(cè)體系已成為行業(yè)質(zhì)量控制的核心環(huán)節(jié)，需綜合運(yùn)用微生物學(xué)、分子生物學(xué)及生化分析技術(shù)進(jìn)行全面評(píng)估。

檢測(cè)項(xiàng)目

嗜熱鏈球菌的核心檢測(cè)項(xiàng)目包括：活菌總數(shù)定量（CFU/g或CFU/mL）、菌種純度鑒定（確認(rèn)無(wú)雜菌污染）、功能性代謝產(chǎn)物分析（如乳酸產(chǎn)量測(cè)定）、抗生素抗性基因篩查、特定生物標(biāo)志物（如胞外多糖）檢測(cè)以及菌株特異性鑒定（區(qū)分不同亞型）。其中活菌計(jì)數(shù)是基礎(chǔ)項(xiàng)目，直接反映產(chǎn)品中功能性菌群的存活率；而菌株特異性鑒定則對(duì)知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)和功效溯源具有重要意義。

檢測(cè)儀器

檢測(cè)過(guò)程需依賴(lài)多種專(zhuān)業(yè)儀器：恒溫培養(yǎng)箱（維持45℃嗜熱環(huán)境）、全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀（快速統(tǒng)計(jì)平板菌落）、PCR儀（用于16S rRNA基因擴(kuò)增鑒定）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)（qPCR，實(shí)現(xiàn)高靈敏度定量檢測(cè)）、生物安全柜（無(wú)菌操作保障）、顯微成像系統(tǒng)（形態(tài)學(xué)觀察）、高效液相色譜儀（HPLC，分析乳酸等代謝產(chǎn)物）以及基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜儀（MALDI-TOF MS，快速菌種鑒定）。自動(dòng)化設(shè)備如全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)可顯著提升檢測(cè)效率。

檢測(cè)方法

主流檢測(cè)方法分為三類(lèi)：傳統(tǒng)培養(yǎng)法采用M17選擇性培養(yǎng)基，在45℃需氧條件下培養(yǎng)48小時(shí)后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)和鏡檢；分子生物學(xué)方法通過(guò)提取DNA后進(jìn)行PCR擴(kuò)增（引物針對(duì)thermolabile核酸酶基因gltA或16S rRNA），結(jié)合凝膠電泳或qPCR實(shí)現(xiàn)定性與定量；快速檢測(cè)技術(shù)則包括流式細(xì)胞術(shù)（FCM）結(jié)合熒光染料進(jìn)行活/死菌區(qū)分，以及免疫學(xué)方法如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)表面抗原。代謝活性分析常通過(guò)pH滴定或HPLC測(cè)定乳酸產(chǎn)量完成。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

國(guó)內(nèi)外主要遵循以下標(biāo)準(zhǔn)體系：中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.35-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 乳酸菌檢驗(yàn)》明確規(guī)定了嗜熱鏈球菌的平板計(jì)數(shù)法；國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織ISO 7889:2003規(guī)范了酸奶中嗜熱鏈球菌的菌落計(jì)數(shù)流程；AOAC官方方法991.14提供分子鑒定指南；藥典標(biāo)準(zhǔn)如USP <60>涵蓋微生物純度要求；行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)如IDF 117:2003則針對(duì)發(fā)酵乳制品制定菌種比例驗(yàn)證方法。所有檢測(cè)均需在ISO/IEC 17025認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下執(zhí)行，并實(shí)施嚴(yán)格的質(zhì)量控制（如陽(yáng)性對(duì)照菌株ATCC 19258）。