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厭氧亞硫酸鹽還原菌檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-19 19:11:44 更新時(shí)間：2025-07-18 19:11:45

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

厭氧亞硫酸鹽還原菌檢測(cè)概述

厭氧亞硫酸鹽還原菌（ASRB）是一類能在無(wú)氧條件下將亞硫酸鹽還原為硫化物的特殊微生物群，主要包括梭菌屬（如產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌等）。這類細(xì)菌在食品腐敗、罐頭變質(zhì)、醫(yī)療感染及環(huán)境污染中起關(guān)鍵作用，其代謝產(chǎn)生的硫化氫不僅導(dǎo)致產(chǎn)品異味和腐蝕，還可能危害人體健康。因此，對(duì)食品、藥品、水質(zhì)及工業(yè)產(chǎn)品中的ASRB進(jìn)行精準(zhǔn)檢測(cè)，是保障質(zhì)量安全、預(yù)防生物污染的核心環(huán)節(jié)。通過(guò)系統(tǒng)化的檢測(cè)流程，可有效評(píng)估產(chǎn)品滅菌效果、追溯污染源頭，并為風(fēng)險(xiǎn)控制提供科學(xué)依據(jù)。

檢測(cè)項(xiàng)目

ASRB檢測(cè)主要聚焦于以下關(guān)鍵指標(biāo)：
1. 菌落總數(shù)定量：測(cè)定樣品中可培養(yǎng)的ASRB活菌數(shù)量；
2. 菌種鑒定：區(qū)分梭菌屬中的特定致病菌（如產(chǎn)氣莢膜梭菌）；
3. 代謝產(chǎn)物分析：檢測(cè)硫化氫生成量及亞硫酸鹽還原速率；
4. 耐熱性評(píng)估：針對(duì)芽孢存活率進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)估滅菌工藝有效性。

檢測(cè)儀器

檢測(cè)過(guò)程需依賴專業(yè)設(shè)備保障準(zhǔn)確性：
1. 厭氧培養(yǎng)箱：維持嚴(yán)格無(wú)氧環(huán)境（氧濃度<1%），確保菌體正常生長(zhǎng)；
2. 全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀：快速統(tǒng)計(jì)亞硫酸鹽鐵瓊脂平板上的黑色菌落；
3. PCR擴(kuò)增儀：用于16S rRNA基因測(cè)序，輔助菌種分子鑒定；
4. 硫化氫檢測(cè)管：定量分析代謝氣體產(chǎn)物；
5. 滅菌鍋與生物安全柜：保障無(wú)菌操作及實(shí)驗(yàn)人員安全。

檢測(cè)方法

主流方法結(jié)合培養(yǎng)學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)：
1. 標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)法：將樣品接種于亞硫酸鹽鐵瓊脂（如SPS agar），37℃厭氧培養(yǎng)48小時(shí)后，計(jì)數(shù)黑色菌落（FeS沉淀）；
2. MPN法：通過(guò)硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基三級(jí)稀釋，根據(jù)硫化氫生成判定最大可能菌數(shù)；
3. 分子檢測(cè)法：提取DNA后，利用特異性引物（如針對(duì)sul還原酶基因）進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR，實(shí)現(xiàn)快速定量；
4. 芽孢活化法：80℃熱處理10分鐘殺滅營(yíng)養(yǎng)體，再培養(yǎng)計(jì)數(shù)耐熱芽孢。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

檢測(cè)流程嚴(yán)格遵循國(guó)際及國(guó)家規(guī)范：
1. ISO 15213:2003：食品微生物學(xué)-厭氧亞硫酸鹽還原菌計(jì)數(shù)水平方法；
2. GB 4789.13-2012：中國(guó)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗(yàn)；
3. USP <62>：美國(guó)藥典非無(wú)菌產(chǎn)品微生物檢查-梭菌檢測(cè)指南；
4. APHA 9260F：水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中亞硫酸鹽還原菌檢測(cè)方法。所有標(biāo)準(zhǔn)均要求空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照（如產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC 13124）及重復(fù)實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制。