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大腸艾希氏菌檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-19 09:06:07 更新時(shí)間：2025-07-18 09:06:07

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

大腸艾希氏菌檢測(cè)

大腸艾希氏菌（Escherichia coli），通常稱(chēng)為大腸桿菌，是一種常見(jiàn)的革蘭氏陰性菌，廣泛存在于人類(lèi)和溫血?jiǎng)游锏哪c道中。雖然大多數(shù)菌株無(wú)害，但某些致病性菌株（如O157:H7）可導(dǎo)致嚴(yán)重的食源性疾病、水源性腹瀉甚至危及生命的感染。在食品安全、水質(zhì)監(jiān)測(cè)、環(huán)境健康及臨床診斷領(lǐng)域，大腸桿菌檢測(cè)至關(guān)重要。它不僅是評(píng)估食品和水源污染程度的指標(biāo)，還能預(yù)警潛在的健康風(fēng)險(xiǎn)。全球范圍內(nèi)，相關(guān)法規(guī)（如GB標(biāo)準(zhǔn)或ISO標(biāo)準(zhǔn)）強(qiáng)制要求對(duì)食品、飲用水、廢水等進(jìn)行定期檢測(cè)，以確保公共衛(wèi)生安全。隨著技術(shù)進(jìn)步，檢測(cè)方法不斷優(yōu)化，從傳統(tǒng)的培養(yǎng)法發(fā)展到快速分子技術(shù)，提高了敏感性和效率。本文將重點(diǎn)介紹大腸桿菌檢測(cè)的關(guān)鍵方面，包括檢測(cè)項(xiàng)目、儀器、方法和標(biāo)準(zhǔn)。

檢測(cè)項(xiàng)目

大腸桿菌檢測(cè)項(xiàng)目主要涉及不同樣本類(lèi)型中的定量或定性分析。在食品安全領(lǐng)域（如肉類(lèi)、乳制品、蔬菜），常見(jiàn)項(xiàng)目包括總大腸菌群計(jì)數(shù)、糞大腸菌群檢測(cè)（作為大腸桿菌的指示菌）以及特定致病菌株（如產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌）的鑒定。水質(zhì)檢測(cè)中，重點(diǎn)針對(duì)飲用水、地表水和廢水，項(xiàng)目包括大腸桿菌計(jì)數(shù)（單位為CFU/mL或MPN/100mL）和耐熱大腸菌群分析。環(huán)境監(jiān)測(cè)項(xiàng)目還包括土壤、空氣樣本中的污染水平評(píng)估。臨床診斷項(xiàng)目則涉及糞便樣本中的致病性大腸桿菌分型和抗藥性測(cè)試。這些項(xiàng)目旨在評(píng)估衛(wèi)生狀況、預(yù)測(cè)疾病風(fēng)險(xiǎn)并符合監(jiān)管要求。

檢測(cè)儀器

大腸桿菌檢測(cè)中常用的儀器包括培養(yǎng)設(shè)備、分子生物學(xué)儀器和自動(dòng)化系統(tǒng)。培養(yǎng)設(shè)備如恒溫培養(yǎng)箱（用于37°C或44.5°C的培養(yǎng)）、高壓滅菌鍋（用于樣本預(yù)處理）和倒置顯微鏡（用于菌落形態(tài)觀察）。分子生物學(xué)儀器則包括PCR儀（聚合酶鏈反應(yīng)儀，用于DNA擴(kuò)增檢測(cè)基因標(biāo)志物）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（qPCR，提高定量精度）和凝膠電泳系統(tǒng)（用于產(chǎn)物分析）?？焖贆z測(cè)儀器包括酶聯(lián)免疫吸附儀（ELISA，用于抗原-抗體反應(yīng)）和生物傳感器。自動(dòng)化系統(tǒng)如VITEK或BD Phoenix提供高通量檢測(cè)，減少人工干預(yù)。這些儀器需定期校準(zhǔn)和維護(hù)，以確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

檢測(cè)方法

大腸桿菌檢測(cè)方法主要分為傳統(tǒng)培養(yǎng)法、分子生物學(xué)方法和免疫學(xué)方法。傳統(tǒng)培養(yǎng)法包括多管發(fā)酵法（MPN法，通過(guò)系列稀釋和發(fā)酵管檢測(cè)氣體生成）和膜過(guò)濾法（將樣本過(guò)濾后培養(yǎng)在選擇性培養(yǎng)基上，如麥康凱瓊脂）。分子生物學(xué)方法如PCR（檢測(cè)特定基因如uidA或stx）、qPCR（實(shí)時(shí)定量）和基因測(cè)序（用于菌株分型）。免疫學(xué)方法包括ELISA（利用抗體檢測(cè)毒素或抗原）和側(cè)流層析試紙條（快速定性檢測(cè)）。此外，快速商業(yè)試劑盒（如3M Petrifilm）簡(jiǎn)化了操作。這些方法各有優(yōu)劣：培養(yǎng)法成本低但耗時(shí)長(zhǎng)（24-48小時(shí)），分子法快速（幾小時(shí)內(nèi)）但設(shè)備要求高，需根據(jù)樣本類(lèi)型和需求選擇。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

大腸桿菌檢測(cè)遵循國(guó)際、國(guó)家和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，以確保結(jié)果的可比性和可靠性。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)如ISO 16649系列（食品中大腸菌群和大腸桿菌計(jì)數(shù)）、ISO 9308（水質(zhì)檢測(cè)）和USEPA方法（如9223B，用于水樣分析）。中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB）包括GB 4789.3（食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 大腸菌群計(jì)數(shù)）、GB 5750（生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)）和GB/T 18932（蜂蜜中大腸桿菌檢測(cè)）。行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)如AOAC（Association of Official Analytical Chemists）方法用于食品驗(yàn)證。這些標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范了采樣、前處理、檢測(cè)步驟、結(jié)果判讀和報(bào)告要求，強(qiáng)調(diào)質(zhì)量控制（如陽(yáng)性/陰性對(duì)照使用）。檢測(cè)機(jī)構(gòu)需通過(guò)認(rèn)證（如CMA或CNAS）來(lái)確保標(biāo)準(zhǔn)遵從性。