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致病菌（沙門氏菌）檢測

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發(fā)布時間：2025-07-19 06:29:20 更新時間：2025-07-18 06:29:20

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作者：中科光析科學技術研究所檢測中心

引言

沙門氏菌（Salmonella）是一種常見的食源性致病菌，屬于沙門氏菌屬，廣泛存在于環(huán)境中，如家禽、蛋類、肉類和水源等，常通過污染的食物或水傳播給人類，引發(fā)沙門氏菌病。該疾病的典型癥狀包括急性胃腸炎、發(fā)熱、腹痛、腹瀉和嘔吐，嚴重時可導致脫水和敗血癥，尤其對兒童、老年人和免疫力低下群體構成致命威脅。在全球范圍內(nèi)，沙門氏菌感染是食源性疾病的主要病因之一，據(jù)統(tǒng)計，世界衛(wèi)生組織（WHO）報告每年約有數(shù)百萬人感染，造成可觀的經(jīng)濟損失和公共衛(wèi)生負擔。有效的沙門氏菌檢測在食品安全監(jiān)控、臨床診斷和流行病學調(diào)查中至關重要，能及早識別和控制爆發(fā)源，防止大規(guī)模傳播。檢測過程需基于科學原理，確保準確性、靈敏度和特異性，以符合國際標準。隨著科技發(fā)展，檢測技術從傳統(tǒng)培養(yǎng)法向分子生物學和免疫學方法演進，大大提升了檢測效率和可靠性。本篇文章將詳細闡述沙門氏菌檢測的核心要素，包括檢測項目、檢測儀器、檢測方法和檢測標準，為相關從業(yè)人員提供實用參考。

檢測項目

沙門氏菌檢測的核心項目聚焦于識別和量化細菌的存在、種類及相關特性，以確保全面評估風險。主要檢測項目包括：

1. 目標菌株鑒定：沙門氏菌屬包含多種血清型（如Salmonella enterica和Salmonella bongori），檢測需明確血清型，以區(qū)分致病性強弱，例如Typhi血清型引起傷寒。

2. 樣本類型分析：常見樣本包括食品（如雞肉、蛋制品）、水樣、環(huán)境樣本（如土壤）和臨床樣本（如糞便或血液）。檢測項目需針對不同樣本制定預處理方案，例如食品樣本需進行研磨和稀釋。

3. 生化特性測試：通過代謝反應評估細菌的特異性，如三糖鐵培養(yǎng)基上的產(chǎn)氣、產(chǎn)酸表現(xiàn)，以及吲哚試驗等，以確認沙門氏菌的生化圖譜。

4. 血清學分型：利用抗血清進行凝集試驗，確定血清群（如O抗原和H抗原），這是鑒別不同亞型的關鍵項目。

這些項目共同形成檢測框架，確保結果覆蓋細菌的生長特性、傳播途徑和潛在致病力，為后續(xù)干預提供依據(jù)。

檢測儀器

沙門氏菌檢測依賴于一系列專業(yè)儀器，以高效完成樣本處理、培養(yǎng)和分析。常用儀器包括：

1. 恒溫培養(yǎng)箱：用于細菌增菌和培養(yǎng)，溫度控制在37°C左右，以模擬人體環(huán)境促進沙門氏菌生長。

2. PCR儀（聚合酶鏈反應儀）：進行分子檢測的核心設備，可擴增沙門氏菌的特異性基因（如invA基因），實現(xiàn)快速定性分析。

3. 顯微鏡和染色設備：用于初步觀察細菌形態(tài)，如革蘭氏染色后，沙門氏菌呈革蘭氏陰性桿菌。

4. 離心機：用于樣本濃縮和沉淀處理，提高檢測靈敏度。

5. 酶標儀：配合ELISA試劑盒，通過光密度測量檢測抗體-抗原反應，適用于快速篩查。

6. 自動化系統(tǒng)：如VITEK 2鑒定系統(tǒng)，可自動進行生化測試和藥敏分析，提升檢測通量和精度。這些儀器需定期校準和維護，確保結果可靠性。

檢測方法

沙門氏菌檢測方法分為傳統(tǒng)培養(yǎng)法和現(xiàn)代快速法，各具優(yōu)勢，需根據(jù)樣本類型和需求選擇。

1. 培養(yǎng)法（參考方法）：步驟包括預增菌（如用緩沖蛋白胨水）、選擇性增菌（如用SC或TTB培養(yǎng)基）、分離培養(yǎng)（如用SS或XLD瓊脂平板），最后通過生化測試和血清學確認。該方法耗時較長（24-72小時），但靈敏度高，是金標準。

2. 分子生物學方法：如實時熒光定量PCR（qPCR），針對沙門氏菌特異基因進行擴增和檢測，可在數(shù)小時內(nèi)出結果，靈敏度達99%，適用于高通量樣本。

3. 免疫學方法：包括酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）和乳膠凝集試驗，利用抗體捕獲沙門氏菌抗原，簡便快速（1-2小時），常用于現(xiàn)場篩查。

4. 快速檢測試劑盒：如免疫層析試紙條，結合抗原-抗體原理，提供即時結果（15-30分鐘），適合緊急情況。

不同方法可互補使用，例如先用快速法篩查，再用培養(yǎng)法確認，確保檢測全面性。

檢測標準

為確保沙門氏菌檢測的準確性和可比性，國內(nèi)外制定了嚴格的標準，指導操作流程和質(zhì)量控制。

1. 國際標準：ISO 6579:2017（微生物學-沙門氏菌檢測方法），規(guī)定了食品和飼料樣本的檢測步驟，包括增菌、分離和鑒定要求。

2. 美國標準：FDA Bacteriological Analytical Manual（BAM）Chapter 5，詳細說明食品樣本的檢測協(xié)議，強調(diào)培養(yǎng)和PCR的結合使用。

3. 中國標準：GB 4789.4-2016（食品安全國家標準食品微生物學檢驗沙門氏菌檢驗），適用于國內(nèi)食品檢測，規(guī)定樣本處理、培養(yǎng)基使用和結果判讀。

4. 其他標準：如AOAC International Official Methods，針對特定基質(zhì)（如水樣）提供補充指南。

遵守這些標準，需進行內(nèi)部質(zhì)量控制（如使用陽性對照菌株）和外部 proficiency testing，確保檢測結果可溯源。

結論

沙門氏菌檢測是防控食源性疾病的關鍵環(huán)節(jié)，通過系統(tǒng)化的檢測項目、精密儀器、多樣方法和嚴格標準，能有效識別和遏制細菌傳播。未來，隨著納米技術和生物傳感器的發(fā)展，檢測將更快速、便攜。持續(xù)遵守國際規(guī)范，不僅能保障公眾健康，還能推動食品安全體系的完善。