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霉菌檢測

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-16 06:24:39 更新時(shí)間：2025-07-15 06:24:39

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

霉菌檢測：守護(hù)健康與品質(zhì)的關(guān)鍵防線

霉菌，作為自然界中廣泛存在的一類微生物，其重要性不容忽視。某些霉菌在食品發(fā)酵、藥物（如抗生素）生產(chǎn)中發(fā)揮著積極作用；然而，更多種類的霉菌則是令人擔(dān)憂的污染源和潛在危害源。它們能在溫暖潮濕的環(huán)境中迅速繁殖，產(chǎn)生肉眼可見的菌絲和孢子，不僅導(dǎo)致食品、藥品、化妝品、飼料等產(chǎn)品腐敗變質(zhì)、感官性狀惡化、營養(yǎng)價(jià)值降低，更嚴(yán)重的是，許多霉菌能產(chǎn)生毒性極強(qiáng)的真菌毒素（如黃曲霉毒素、赭曲霉毒素等），這些毒素具有致癌、致畸、致突變等嚴(yán)重健康風(fēng)險(xiǎn)，對人體和動(dòng)物健康構(gòu)成重大威脅。因此，對各類基質(zhì)（如食品、環(huán)境、原材料、成品等）進(jìn)行準(zhǔn)確、高效的霉菌檢測，是保障產(chǎn)品質(zhì)量安全、維護(hù)消費(fèi)者健康、符合法規(guī)要求的至關(guān)重要的環(huán)節(jié)。

核心檢測項(xiàng)目

霉菌檢測通常圍繞以下幾個(gè)關(guān)鍵項(xiàng)目展開：

霉菌總數(shù)/菌落總數(shù)： 定量檢測樣品中所有可培養(yǎng)霉菌的總量，反映整體污染程度，是基礎(chǔ)的衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)。
特定種類霉菌的鑒定： 分離并鑒別樣品中存在的具體霉菌種類（如曲霉屬、青霉屬、鐮刀菌屬等），對評估風(fēng)險(xiǎn)來源和針對性控制至關(guān)重要。
產(chǎn)毒霉菌的檢測： 專門針對已知能產(chǎn)生強(qiáng)效真菌毒素的霉菌種類（如黃曲霉、寄生曲霉、赭曲霉等）進(jìn)行篩查和鑒定。
真菌毒素檢測： 雖然毒素本身是化學(xué)污染物，但其檢測常與霉菌檢測相關(guān)聯(lián)，直接測定霉菌產(chǎn)生的毒素含量，評估最終的安全風(fēng)險(xiǎn)。

常用檢測儀器

實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確、高效的霉菌檢測離不開專業(yè)儀器的支持：

生物安全柜/超凈工作臺： 提供無菌操作環(huán)境，防止檢測過程中樣品被環(huán)境中的霉菌污染，也保護(hù)操作人員安全。
恒溫培養(yǎng)箱： 為霉菌生長提供最適宜的溫度（通常25-30°C）和濕度條件，是培養(yǎng)法的核心設(shè)備。
高壓蒸汽滅菌鍋： 對培養(yǎng)基、玻璃器皿、采樣工具等進(jìn)行徹底滅菌，保證實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)無菌。
顯微鏡（光學(xué)/體視/熒光）： 觀察霉菌菌落形態(tài)、孢子結(jié)構(gòu)、菌絲特征，是形態(tài)學(xué)鑒定的主要工具。
菌落計(jì)數(shù)器： 輔助或半自動(dòng)地對培養(yǎng)皿上的霉菌菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，提高效率和準(zhǔn)確性。
PCR儀及配套設(shè)備： 用于基于分子生物學(xué)方法（如PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR）的快速檢測和鑒定，具有高靈敏度和特異性。
酶標(biāo)儀/化學(xué)發(fā)光檢測儀： 用于基于免疫學(xué)原理（如ELISA）的真菌毒素或某些霉菌抗原的快速檢測。

主要檢測方法

霉菌檢測方法主要分為傳統(tǒng)培養(yǎng)法和現(xiàn)代快速檢測法兩大類：

1. 傳統(tǒng)培養(yǎng)計(jì)數(shù)法（常用標(biāo)準(zhǔn)方法）:
- 原理： 利用霉菌在特定培養(yǎng)基上生長形成可見菌落的特性進(jìn)行計(jì)數(shù)和分離。
- 流程： 樣品均質(zhì) → 系列稀釋 → 選擇適宜稀釋度涂布或傾注平板（常用培養(yǎng)基如馬鈴薯葡萄糖瓊脂PDA、孟加拉紅培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基等） → 適宜溫度下培養(yǎng)（通常3-7天） → 菌落計(jì)數(shù) → 報(bào)告結(jié)果（CFU/g或CFU/mL）。
- 特點(diǎn)： 是國內(nèi)外法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)的基準(zhǔn)方法，結(jié)果直觀可靠，可進(jìn)行后續(xù)分離鑒定和保藏；但耗時(shí)長，對產(chǎn)孢慢或不產(chǎn)孢的霉菌可能低估。
2. 快速檢測法：
- 分子生物學(xué)方法（如PCR, qPCR, LAMP, 基因測序）： 通過檢測霉菌特定的DNA/RNA片段進(jìn)行快速、高靈敏度、高特異性的定性和定量分析，尤其適用于特定產(chǎn)毒菌的篩查或難以培養(yǎng)霉菌的檢測。
- 免疫學(xué)方法（如ELISA, 膠體金試紙條）： 利用抗原-抗體反應(yīng)原理檢測霉菌細(xì)胞壁成分（如β-D-葡聚糖）或特定的真菌毒素。速度快（數(shù)小時(shí)），操作相對簡便，適合現(xiàn)場快速篩查。
- 其他： ATP生物發(fā)光法（檢測微生物總量，區(qū)分度不高）、流式細(xì)胞儀、傅里葉變換紅外光譜（FTIR）等方法也在探索應(yīng)用中。

關(guān)鍵檢測標(biāo)準(zhǔn)

霉菌檢測必須依據(jù)權(quán)威的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范進(jìn)行操作，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性、可比性和法律效力。國內(nèi)外主要相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)包括：

中國國家標(biāo)準(zhǔn)（GB）：
- GB 4789.15-2016 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 霉菌和酵母計(jì)數(shù)》 - 食品中霉菌和酵母計(jì)數(shù)的基準(zhǔn)方法（培養(yǎng)法）。
- GB 5009.22X系列 - 針對不同食品中各種真菌毒素（如黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2、M1，脫氧雪腐鐮刀菌烯醇DON，赭曲霉毒素A等）的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)。
- 其他相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)如藥品、化妝品、飼料、環(huán)境等領(lǐng)域的微生物限度檢查標(biāo)準(zhǔn)中均包含霉菌檢測要求。
國際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）：
- ISO 21527-1:2008 & ISO 21527-2:2008 《食品和動(dòng)物飼料的微生物學(xué) 酵母和霉菌計(jì)數(shù)的水平方法》 - 分兩部分規(guī)定了不同水分活度產(chǎn)品的檢測方法。
- ISO 16050:2003 《食品黃曲霉毒素B1及黃曲霉毒素B1, B2, G1和G2總量的測定免疫親和柱層析凈化高效液相色譜法》 - 真菌毒素檢測的代表性標(biāo)準(zhǔn)。
美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）/公職分析化學(xué)家協(xié)會(huì)（AOAC）： 有眾多關(guān)于食品、藥品中霉菌檢測及真菌毒素檢測的官方方法和推薦方法（如AOAC Official Methods）。
歐洲藥典（EP） / 美國藥典（USP）： 對藥品及輔料的微生物限度（含霉菌）檢查有明確規(guī)定。

選擇標(biāo)準(zhǔn)的原則： 檢測時(shí)應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的類型、基質(zhì)特性、法規(guī)要求以及檢測目的（是常規(guī)監(jiān)控、風(fēng)險(xiǎn)篩查還是確證）來選擇合適的檢測方法和遵循的標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述，霉菌檢測是一個(gè)涉及多項(xiàng)目、多儀器、多方法、多標(biāo)準(zhǔn)的復(fù)雜體系。無論是采用傳統(tǒng)的培養(yǎng)法還是新興的快速技術(shù)，都必須嚴(yán)格按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行，并結(jié)合良好的實(shí)驗(yàn)室規(guī)范（GLP），才能確保檢測結(jié)果的科學(xué)、準(zhǔn)確、可靠，為產(chǎn)品質(zhì)量安全和公眾健康提供堅(jiān)實(shí)的保障。持續(xù)關(guān)注標(biāo)準(zhǔn)更新和新技術(shù)發(fā)展，不斷提升檢測能力至關(guān)重要。