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大腸菌群檢測

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發(fā)布時間：2025-05-15 08:51:12 更新時間：2025-05-14 08:51:31

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

大腸菌群檢測技術(shù)

檢測的重要性和背景介紹

大腸菌群檢測是水質(zhì)、食品和環(huán)境監(jiān)測中最重要的衛(wèi)生指標(biāo)檢測項目之一。作為糞便污染的指示微生物，大腸菌群的存在直接反映了樣品受糞便污染的程度和潛在的致病風(fēng)險。在飲用水安全監(jiān)測、食品衛(wèi)生質(zhì)量控制、游泳池水質(zhì)管理以及環(huán)境保護(hù)等多個領(lǐng)域都具有重要意義。根據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全球每年因飲用水污染導(dǎo)致的腹瀉病例高達(dá)17億例，其中大腸菌群超標(biāo)是主要誘因之一。在水處理工藝評估、食品安全風(fēng)險評估以及流行病學(xué)調(diào)查等方面，大腸菌群檢測都發(fā)揮著不可替代的作用。

具體的檢測項目和范圍

大腸菌群檢測主要包括以下具體項目：1)總大腸菌群檢測，用于判定樣品是否受到糞便污染；2)耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)檢測，更直接反映糞便污染情況；3)大腸埃希氏菌檢測，最具代表性的糞源性致病菌。檢測范圍涵蓋飲用水、礦泉水、瓶裝水等各類水體；乳制品、肉制品、水產(chǎn)品等各類食品；以及游泳池水、地表水、醫(yī)院污水等環(huán)境樣品。根據(jù)不同的檢測目的，可以選擇不同級別的檢測項目。

使用的檢測儀器和設(shè)備

大腸菌群檢測需要使用以下專業(yè)儀器設(shè)備：1)高壓蒸汽滅菌器(121℃,15psi)；2)恒溫培養(yǎng)箱(36±1℃和44.5±0.5℃)；3)生物安全柜(二級)；4)菌落計數(shù)器；5)pH計；6)天平(精度0.1g)；7)微量移液器(1mL和0.1mL)；8)過濾裝置(孔徑0.45μm)等。對于分子生物學(xué)檢測方法還需要PCR儀、電泳設(shè)備等。實驗室還需配備培養(yǎng)基制備相關(guān)設(shè)備，如磁力攪拌器、水浴鍋等。

標(biāo)準(zhǔn)檢測方法和流程

目前主要采用的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法包括：1)多管發(fā)酵法：適用于各類樣品，通過初發(fā)酵、復(fù)發(fā)酵和驗證試驗三步完成；2)濾膜法：適用于較清潔水樣，將水樣過濾后培養(yǎng)計數(shù)；3)酶底物法：使用特定顯色培養(yǎng)基快速檢測；4)PCR分子檢測法：檢測特異性基因片段。標(biāo)準(zhǔn)流程為：樣品采集(無菌操作)→樣品運輸(4℃,6h內(nèi))→樣品預(yù)處理→選擇適當(dāng)方法檢測→培養(yǎng)觀察(24-48h)→結(jié)果判讀→數(shù)據(jù)記錄。特別注意樣品的代表性采集和全程無菌操作。

檢測結(jié)果的評判標(biāo)準(zhǔn)

檢測結(jié)果評判依據(jù)不同樣品類型對應(yīng)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：1)飲用水：GB 5749-2022規(guī)定總大腸菌群不得檢出/100mL；2)瓶裝水：GB 8537-2018規(guī)定不得檢出/250mL；3)食品：根據(jù)不同食品類別，GB 29921-2021規(guī)定限值為10-1000CFU/g(mL)不等；4)游泳池水：GB 37488-2019規(guī)定≤200CFU/100mL。對于多管發(fā)酵法結(jié)果采用MPN(最可能數(shù))表示，濾膜法結(jié)果以CFU(菌落形成單位)表示。當(dāng)檢測結(jié)果超出標(biāo)準(zhǔn)限值時，應(yīng)判定為不合格，并立即啟動復(fù)檢和污染源調(diào)查程序。