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活性氧檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-05-15 08:49:58 更新時(shí)間：2025-05-14 08:49:59

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

活性氧檢測(cè)的重要性與應(yīng)用背景

活性氧（Reactive Oxygen Species, ROS）是生物體內(nèi)一類具有高反應(yīng)活性的含氧分子或自由基的總稱，包括超氧陰離子（O??）、過氧化氫（H?O?）、羥基自由基（·OH）等。它們?cè)诩?xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、免疫防御等生理過程中發(fā)揮重要作用，但過量積累會(huì)導(dǎo)致氧化應(yīng)激，引發(fā)DNA損傷、蛋白質(zhì)變性及脂質(zhì)過氧化，進(jìn)而與癌癥、神經(jīng)退行性疾病和衰老等密切相關(guān)。因此，準(zhǔn)確檢測(cè)活性氧的水平對(duì)于疾病機(jī)制研究、藥物開發(fā)以及環(huán)境毒理學(xué)評(píng)估具有重要意義。

隨著生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的深入，活性氧檢測(cè)已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、食品科學(xué)及環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。通過定量分析ROS的動(dòng)態(tài)變化，科研人員能夠評(píng)估細(xì)胞氧化還原狀態(tài)、抗氧化劑效能以及外源性刺激（如污染物、輻射）對(duì)生物體的影響。然而，由于其高反應(yīng)性和短壽命特性，活性氧的檢測(cè)面臨方法選擇、靈敏度及特異性等多重挑戰(zhàn)。

活性氧檢測(cè)的主要項(xiàng)目

活性氧檢測(cè)的核心目標(biāo)是針對(duì)不同ROS分子進(jìn)行定性和定量分析，常見檢測(cè)項(xiàng)目包括：

超氧陰離子（O??）：評(píng)估線粒體呼吸鏈功能及炎癥反應(yīng)；
過氧化氫（H?O?）：研究細(xì)胞信號(hào)通路及氧化損傷程度；
羥基自由基（·OH）：檢測(cè)環(huán)境中自由基污染及抗氧化劑效力；
脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物（如MDA）：衡量細(xì)胞膜氧化損傷程度。

常用檢測(cè)儀器與技術(shù)

活性氧檢測(cè)依賴高精度儀器與探針技術(shù)，主流設(shè)備包括：

熒光光譜儀：利用DCFH-DA、DHE等熒光探針標(biāo)記ROS，通過熒光強(qiáng)度量化含量；
電子順磁共振波譜儀（EPR）：直接捕獲自由基信號(hào)，特異性高但設(shè)備成本昂貴；
化學(xué)發(fā)光分析儀：基于魯米諾等試劑與ROS反應(yīng)產(chǎn)生光信號(hào)，靈敏度優(yōu)異；
流式細(xì)胞儀：結(jié)合熒光探針實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞水平ROS動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。

主流檢測(cè)方法及原理

根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)和技術(shù)特點(diǎn)，活性氧檢測(cè)方法主要分為以下幾類：

化學(xué)探針法：如DCFH-DA在細(xì)胞內(nèi)被酯酶水解后與ROS反應(yīng)生成熒光物質(zhì)，適用于活細(xì)胞實(shí)時(shí)成像；
酶活性測(cè)定法：通過SOD、CAT等抗氧化酶活性間接反映ROS水平；
電化學(xué)傳感器法：利用納米材料修飾電極特異性捕獲ROS，實(shí)現(xiàn)快速在線檢測(cè)；
免疫學(xué)方法：如ELISA檢測(cè)氧化應(yīng)激標(biāo)志物8-OHdG、3-NT等。