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總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-31 12:00:24 更新時(shí)間：2025-07-30 12:00:24

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌檢測(cè)概述

在環(huán)境衛(wèi)生、食品安全和公共衛(wèi)生監(jiān)測(cè)領(lǐng)域中，總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌作為關(guān)鍵指示微生物，扮演著至關(guān)重要的角色。總大腸菌群（Total Coliforms）是一類(lèi)廣泛存在于自然環(huán)境的革蘭氏陰性桿菌，主要包括腸桿菌科細(xì)菌，它們常被用作水和食品受污染程度的初步指標(biāo)；糞大腸菌群（Fecal Coliforms）則特指能在較高溫度下生長(zhǎng)的總大腸菌群亞群，主要源自動(dòng)物或人類(lèi)糞便，用于直接評(píng)估糞便污染風(fēng)險(xiǎn)；大腸埃希氏菌（Escherichia coli）作為糞大腸菌群中的代表性細(xì)菌，因其高度特異性與致病潛力（如導(dǎo)致腹瀉等疾?。?，被視為最可靠的糞便污染指標(biāo)。這些微生物的檢測(cè)不僅能預(yù)警水源或食品的衛(wèi)生狀況，還能預(yù)防水源性疾病爆發(fā)，例如通過(guò)監(jiān)測(cè)飲用水、污水或食品加工環(huán)境，確保符合全球衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。檢測(cè)過(guò)程通?；谖⑸飳W(xué)原理，涉及培養(yǎng)、生化測(cè)試和分子生物學(xué)技術(shù)，旨在快速準(zhǔn)確地量化污染水平。本文將系統(tǒng)介紹檢測(cè)項(xiàng)目、檢測(cè)儀器、檢測(cè)方法和檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)四大核心內(nèi)容，為相關(guān)從業(yè)人員提供實(shí)用指導(dǎo)。

檢測(cè)項(xiàng)目

檢測(cè)項(xiàng)目主要圍繞總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌三大類(lèi)進(jìn)行獨(dú)立或聯(lián)合分析。總大腸菌群項(xiàng)目關(guān)注細(xì)菌總數(shù)，包括埃希氏菌屬、腸桿菌屬等，用于評(píng)估整體污染程度；糞大腸菌群項(xiàng)目則聚焦于可在44.5°C下生長(zhǎng)的亞群，以識(shí)別糞便特異性污染；大腸埃希氏菌項(xiàng)目針對(duì)特定菌株（如E. coli O157:H7），用于檢測(cè)致病風(fēng)險(xiǎn)。每個(gè)項(xiàng)目都涉及定量分析（如單位體積中的菌落形成單位CFU），并結(jié)合定性測(cè)試（如生化特征鑒定）。在實(shí)施中，項(xiàng)目設(shè)計(jì)需考慮樣品類(lèi)型（如飲用水、食品或廢水）、目標(biāo)精度和檢測(cè)目的（如常規(guī)監(jiān)測(cè)或疫情響應(yīng)）。

檢測(cè)儀器

常用檢測(cè)儀器包括培養(yǎng)箱、顯微鏡、酶標(biāo)儀、PCR儀和自動(dòng)化設(shè)備。培養(yǎng)箱（如恒溫培養(yǎng)箱）用于在37°C或44.5°C下培養(yǎng)樣品，促進(jìn)菌落生長(zhǎng)；顯微鏡用于直接觀察細(xì)菌形態(tài)或進(jìn)行染色分析；酶標(biāo)儀（如分光光度計(jì)）在酶底物法中檢測(cè)底物變色反應(yīng)；PCR儀（聚合酶鏈反應(yīng)儀）則用于分子檢測(cè)，通過(guò)擴(kuò)增特定DNA序列識(shí)別目標(biāo)菌；自動(dòng)化設(shè)備（如全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)）能高效處理大批量樣品。儀器選擇取決于檢測(cè)方法，例如快速檢測(cè)法優(yōu)先使用酶標(biāo)儀或PCR儀，而傳統(tǒng)法依賴(lài)培養(yǎng)箱。所有儀器需定期校準(zhǔn)以確保準(zhǔn)確性。

檢測(cè)方法

檢測(cè)方法主要包括培養(yǎng)法、酶底物法和分子生物學(xué)法。培養(yǎng)法是多管發(fā)酵法（MPN法）和膜過(guò)濾法的代表，其中MPN法通過(guò)系列稀釋和發(fā)酵管變色判斷細(xì)菌數(shù)量，膜過(guò)濾法使用濾膜培養(yǎng)計(jì)數(shù)菌落；酶底物法（如Colilert試劑盒）利用底物（如ONPG或MUG）在酶作用下變色來(lái)快速檢測(cè)，適合現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用；分子生物學(xué)法包括PCR或qPCR，通過(guò)擴(kuò)增大腸埃希氏菌的特定基因（如uidA）實(shí)現(xiàn)高靈敏度鑒定。方法選擇需權(quán)衡速度、成本和精度——培養(yǎng)法耗時(shí)但成本低（需24-48小時(shí)），酶底物法可在18小時(shí)內(nèi)出結(jié)果，分子法最快（幾小時(shí)），但設(shè)備要求高。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)遵循國(guó)際和國(guó)家規(guī)范，確保結(jié)果可比性和可靠性。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)包括ISO 9308-1（水質(zhì)大腸菌群和埃希氏菌檢測(cè)的多管發(fā)酵法）、ISO 16649（食品中大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)），以及美國(guó)EPA方法（如EPA 1603用于膜過(guò)濾法）。中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)如GB 5750（生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法）和GB/T 4789（食品微生物學(xué)檢驗(yàn)），均規(guī)定了采樣、測(cè)試和報(bào)告要求。標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)調(diào)質(zhì)量控制，如陽(yáng)性/陰性對(duì)照、定期校準(zhǔn)和人員培訓(xùn)。遵守這些標(biāo)準(zhǔn)是獲得認(rèn)證（如HACCP或ISO認(rèn)證）的基礎(chǔ)，能有效預(yù)防公共衛(wèi)生事件。