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總蒽醌（結(jié)合蒽醌、游離蒽醌）檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-26 22:54:01 更新時(shí)間：2025-07-25 22:54:01

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

蒽醌類化合物是一類在自然界中廣泛存在的芳香族化合物，尤其在藥用植物如大黃、蘆薈、決明子中含量豐富，具有顯著的生物活性，包括瀉下、抗菌、抗炎和抗腫瘤等作用?？傒祯侵钢参锘蛩幬飿悠分兴休祯惢衔锏目偤?，它被進(jìn)一步細(xì)分為結(jié)合蒽醌和游離蒽醌兩部分。結(jié)合蒽醌（如蒽醌苷）通過(guò)糖苷鍵與糖分子連接，需要在腸道中被水解后才能發(fā)揮生理效果；而游離蒽醌（如蒽醌苷元）則直接具有生物活性，易被吸收利用。檢測(cè)總蒽醌含量在中藥質(zhì)量控制、藥品研發(fā)、食品安全和環(huán)境監(jiān)測(cè)中具有重要意義，例如，在中藥制劑中，總蒽醌含量是評(píng)價(jià)其藥效和安全性的關(guān)鍵指標(biāo)，過(guò)高或過(guò)低都可能影響臨床效果。近年來(lái)，隨著分析技術(shù)的進(jìn)步，總蒽醌檢測(cè)已成為藥物分析和植物化學(xué)研究的熱點(diǎn)，本文章將系統(tǒng)介紹檢測(cè)項(xiàng)目、儀器、方法和標(biāo)準(zhǔn)，為相關(guān)從業(yè)人員提供實(shí)用參考。

檢測(cè)項(xiàng)目

總蒽醌檢測(cè)涉及三個(gè)核心項(xiàng)目：總蒽醌含量、結(jié)合蒽醌含量和游離蒽醌含量?？傒祯看順悠分兴休祯惢衔锏目傎|(zhì)量分?jǐn)?shù)，通常以毫克每克（mg/g）或百分比（%）表示；結(jié)合蒽醌含量特指與糖分子結(jié)合的蒽醌苷部分，需通過(guò)水解步驟轉(zhuǎn)化為游離形式后進(jìn)行測(cè)定；游離蒽醌含量則指未結(jié)合的蒽醌苷元，可直接檢測(cè)其活性成分。這些項(xiàng)目的檢測(cè)不僅用于評(píng)估藥物或植物材料的純度、一致性和穩(wěn)定性，還為劑量控制提供依據(jù)，例如在中藥配方中，游離蒽醌的過(guò)高含量可能導(dǎo)致副作用，而結(jié)合蒽醌的合理比例則能平衡藥效。檢測(cè)時(shí)，需確保樣品均勻取樣，避免氧化或降解，以獲取可靠數(shù)據(jù)。

檢測(cè)儀器

進(jìn)行總蒽醌檢測(cè)時(shí)，常用儀器包括紫外-可見分光光度計(jì)、高效液相色譜儀（HPLC）、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS）以及輔助設(shè)備。紫外-可見分光光度計(jì)用于基于比色法的快速篩選，價(jià)格較低且操作簡(jiǎn)便；高效液相色譜儀（HPLC）是核心儀器，配備紫外檢測(cè)器（UVD）或二極管陣列檢測(cè)器（DAD），能實(shí)現(xiàn)高精度分離和定量，尤其適用于復(fù)雜樣品中的游離蒽醌檢測(cè)；LC-MS結(jié)合質(zhì)譜檢測(cè)，提供高靈敏度和特異性，適用于痕量分析。輔助設(shè)備包括恒溫水浴鍋（用于水解步驟）、離心機(jī)（用于樣品分離）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（用于溶劑濃縮）和pH計(jì)（控制水解條件）。這些儀器需定期校準(zhǔn)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，例如HPLC的柱溫箱控制在25-35°C，流速保持在1.0 mL/min左右。

檢測(cè)方法

總蒽醌檢測(cè)的主流方法包括分光光度法和高效液相色譜法（HPLC）。分光光度法操作簡(jiǎn)單：首先，樣品經(jīng)研磨后，用甲醇或乙醇溶液在50-60°C下提取，然后對(duì)提取液進(jìn)行水解（常用2M鹽酸處理30分鐘，將結(jié)合蒽醌轉(zhuǎn)化為游離形式），最后在紫外分光光度計(jì)上于510 nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度，計(jì)算總蒽醌含量（通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì)）。HPLC法更精確：樣品經(jīng)類似提取和水解后，注入HPLC系統(tǒng)，使用C18反相色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-水或乙腈-磷酸緩沖液，梯度洗脫，在254 nm或430 nm檢測(cè)波長(zhǎng)下分析，游離蒽醌直接定量，結(jié)合蒽醌通過(guò)水解前后差值計(jì)算。此外，薄層色譜掃描法（TLC）可用于初步篩查。所有方法需注意樣品預(yù)處理（如脫色過(guò)濾）和質(zhì)量控制（如加標(biāo)回收率測(cè)試），確保低檢測(cè)限（如HPLC法可達(dá)0.1 μg/mL）和高回收率（>95%）。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

總蒽醌檢測(cè)必須遵循國(guó)際和國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)，以確保結(jié)果的可比性和合規(guī)性。主要標(biāo)準(zhǔn)包括《中國(guó)藥典》（2020年版），其中明確要求使用HPLC法測(cè)定大黃等藥材的總蒽醌含量，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了樣品制備、水解條件、色譜參數(shù)和計(jì)算方式（如以1,8-二羥基蒽醌為對(duì)照品）；美國(guó)藥典（USP43-NF38）則推薦分光光度法和HPLC法，強(qiáng)調(diào)檢測(cè)限和精密度要求（如RSD < 2%）。其他標(biāo)準(zhǔn)如ISO 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)、歐洲藥典（EP）或行業(yè)規(guī)范，也規(guī)定了殘留溶劑、重金屬和微生物限度等附加檢測(cè)項(xiàng)目。在實(shí)施中，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室需建立標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），包括校準(zhǔn)曲線制作、空白對(duì)照和重復(fù)測(cè)試（至少三次），以確保方法驗(yàn)證通過(guò)（如線性范圍R2 > 0.999）。這些標(biāo)準(zhǔn)不僅保障藥品安全，還促進(jìn)國(guó)際貿(mào)易中的質(zhì)量互認(rèn)。