實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)檢測(cè)
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發(fā)布時(shí)間:2025-07-21 09:37:39 更新時(shí)間:2025-07-20 09:37:39
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作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)檢測(cè):保障動(dòng)物健康與研究可靠性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)
在生物醫(yī)學(xué)研究中,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康狀態(tài)是獲得可靠、可重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)保障。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)感染是一個(gè)普遍存在且不容忽視的問(wèn)題。寄生蟲(chóng)的存在不僅" />
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作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心
在生物醫(yī)學(xué)研究中,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康狀態(tài)是獲得可靠、可重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)保障。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)感染是一個(gè)普遍存在且不容忽視的問(wèn)題。寄生蟲(chóng)的存在不僅直接影響動(dòng)物自身的生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖性能、免疫功能和福利狀況,導(dǎo)致疾病甚至死亡,還會(huì)嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和科學(xué)性。例如,某些寄生蟲(chóng)的代謝產(chǎn)物、組織損傷或引起的免疫反應(yīng),會(huì)改變宿主的生理生化指標(biāo)、藥物代謝動(dòng)力學(xué)、免疫應(yīng)答等關(guān)鍵研究參數(shù),導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的偏差或錯(cuò)誤解讀。因此,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行嚴(yán)格的、定期的寄生蟲(chóng)檢測(cè),是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制體系中至關(guān)重要的一環(huán),是確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量符合SPF(無(wú)特定病原體)或無(wú)特定寄生蟲(chóng)等級(jí)要求,進(jìn)而保障生物醫(yī)學(xué)研究質(zhì)量與生物安全的必要手段。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)檢測(cè)項(xiàng)目主要針對(duì)兩大類(lèi)寄生蟲(chóng)及其相關(guān)發(fā)育階段:
1. 體外寄生蟲(chóng):主要寄生于動(dòng)物體表及被毛中。 * 螨蟲(chóng):如鼠螨、兔螨、疥螨、蠕形螨等,引起皮炎、脫毛、搔癢。 * 虱、蚤:如嚙毛虱、跳蚤等,吸血、引起刺激和不適。 * 蜱:雖較少見(jiàn),但危害大。
2. 體內(nèi)寄生蟲(chóng):主要寄生于動(dòng)物體內(nèi)各器官和組織。 * 蠕蟲(chóng): * 線蟲(chóng):如管狀線蟲(chóng)(鼠)、四翼無(wú)刺線蟲(chóng)(鼠)、栓尾線蟲(chóng)(兔、嚙齒類(lèi))、蟯蟲(chóng)(猴)、蛔蟲(chóng)(犬、猴)、鞭蟲(chóng)(猴)、旋毛蟲(chóng)(豬、嚙齒類(lèi))、廣州管圓線蟲(chóng)(猴)、肝毛細(xì)線蟲(chóng)等。 * 絳蟲(chóng):如膜殼絳蟲(chóng)(嚙齒類(lèi))、犬復(fù)孔絳蟲(chóng)(犬、貓)、豆?fàn)钅椅豺剩ㄍ茫┑取? * 原蟲(chóng): * 腸道原蟲(chóng):如賈第鞭毛蟲(chóng)、球蟲(chóng)(艾美耳球蟲(chóng)、等孢球蟲(chóng)等)、小袋纖毛蟲(chóng)、隱孢子蟲(chóng)、阿米巴原蟲(chóng)(溶組織內(nèi)阿米巴、結(jié)腸內(nèi)阿米巴等)、六鞭毛蟲(chóng)、毛滴蟲(chóng)等。 * 血液/組織原蟲(chóng):如弓形蟲(chóng)、卡氏肺孢子蟲(chóng)(雖常歸類(lèi)為真菌,但檢測(cè)方法類(lèi)似)等。 * 蟲(chóng)卵/卵囊/包囊:在糞便中檢測(cè)蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵或原蟲(chóng)卵囊/包囊是重要的間接診斷依據(jù)。
寄生蟲(chóng)檢測(cè)依賴(lài)于多種實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備:
1. 顯微鏡:是寄生蟲(chóng)形態(tài)學(xué)檢測(cè)的核心工具。 * 光學(xué)顯微鏡(含油鏡):用于觀察糞便涂片、組織壓片/切片、血液涂片中的蟲(chóng)體、蟲(chóng)卵、卵囊、包囊、滋養(yǎng)體等,進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。 * 體視顯微鏡(解剖鏡):用于檢查動(dòng)物體表、被毛中的體外寄生蟲(chóng)(如虱、蚤、螨),也可用于檢查腸道內(nèi)容物或組織中的較大蠕蟲(chóng)。
2. 離心機(jī):用于糞便樣本的離心沉淀或漂浮濃縮處理,提高蟲(chóng)卵/卵囊的檢出率。
3. 恒溫培養(yǎng)箱:用于特定原蟲(chóng)(如球蟲(chóng)卵囊)的孢子化培養(yǎng)。
4. 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀(PCR儀):用于進(jìn)行寄生蟲(chóng)特異性核酸(DNA/RNA)的擴(kuò)增,是分子生物學(xué)檢測(cè)的核心設(shè)備,具有高靈敏度和特異性。
5. 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定儀(ELISA Reader/Washer):用于檢測(cè)動(dòng)物血清或糞便中的寄生蟲(chóng)特異性抗體或抗原。
6. 切片機(jī)及染色設(shè)備:用于制作組織病理學(xué)切片(石蠟或冷凍切片),通過(guò)特殊染色(如HE染色、Gram染色、銀染、抗酸染色等)觀察組織內(nèi)的蟲(chóng)體或病變。
7. 基本實(shí)驗(yàn)室設(shè)備:如天平、磁力攪拌器、移液器、水浴鍋/金屬浴、生物安全柜、冰箱/冰柜、消毒設(shè)備等。
根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)的不同,主要采用以下方法:
1. 體外寄生蟲(chóng)檢測(cè): * 直接檢查法:肉眼或借助體視顯微鏡仔細(xì)檢查動(dòng)物體表、被毛、耳廓、趾間、肛門(mén)周?chē)炔课?,尋找成蟲(chóng)、蟲(chóng)卵或皮屑中的螨蟲(chóng)。常用透明膠帶粘取法或拔毛檢查法。 * 皮膚刮屑檢查:對(duì)疑似螨蟲(chóng)感染的部位進(jìn)行刮皮,將皮屑置于載玻片上,加甘油或氫氧化鉀溶液透明后鏡檢。
2. 體內(nèi)寄生蟲(chóng)檢測(cè) - 糞便檢查(主要針對(duì)腸道寄生蟲(chóng)): * 直接涂片法:取少量新鮮糞便與生理鹽水混合涂片,直接鏡檢尋找活的原蟲(chóng)滋養(yǎng)體、包囊、蟲(chóng)卵。簡(jiǎn)便快速,但檢出率低。 * 飽和鹽水漂浮法:利用飽和鹽水高比重使蟲(chóng)卵/卵囊漂浮集中到液面。是檢查線蟲(chóng)卵、絳蟲(chóng)卵、球蟲(chóng)卵囊等的常用方法。 * 沉淀法(自然沉淀法/離心沉淀法):利用蟲(chóng)卵/包囊比重大的特性,經(jīng)水洗自然沉淀或離心后收集沉渣鏡檢。對(duì)吸蟲(chóng)卵、棘頭蟲(chóng)卵、原蟲(chóng)包囊效果好。 * 濃集法:如甲醛-乙酸乙酯沉淀法(又稱(chēng)MIFC或FECT法),能同時(shí)濃集多種蟲(chóng)卵、包囊、卵囊,效果較好。 * 染色法:如盧戈氏碘液染色(染原蟲(chóng)包囊)、抗酸染色(染隱孢子蟲(chóng)卵囊)、三色染色(染原蟲(chóng))等,提高形態(tài)辨識(shí)度。 * 培養(yǎng)法:如球蟲(chóng)卵囊的孢子化培養(yǎng),有助于蟲(chóng)種鑒定。
3. 體內(nèi)寄生蟲(chóng)檢測(cè) - 血液/組織檢查: * 血液涂片染色鏡檢:如吉姆薩或瑞氏染色,檢查血液中瘧原蟲(chóng)、錐蟲(chóng)、巴貝斯蟲(chóng)等。 * 組織壓片/切片鏡檢:取可疑組織(如肺、肝、腸、肌肉)做壓片或病理切片,染色后鏡檢尋找蟲(chóng)體或特征性病變(如旋毛蟲(chóng)囊包、弓形蟲(chóng)包囊/假包囊、肺孢子蟲(chóng))。 * 組織勻漿鏡檢:如檢查肺組織中的肺孢子蟲(chóng)。
4. 免疫學(xué)檢測(cè): * 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn):檢測(cè)血清中的寄生蟲(chóng)特異性抗體(如弓形蟲(chóng)IgG/IgM、旋毛蟲(chóng)抗體)或糞便/血液中的特異性抗原(如賈第鞭毛蟲(chóng)抗原、隱孢子蟲(chóng)抗原)。 * 免疫熒光試驗(yàn):檢測(cè)組織或糞便樣本中的寄生蟲(chóng)抗原。 * 膠體金免疫層析試紙條:快速檢測(cè)某些寄生蟲(chóng)(如弓形蟲(chóng)、旋毛蟲(chóng))的抗體或抗原。
5. 分子生物學(xué)檢測(cè): * 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng):檢測(cè)寄生蟲(chóng)特異性核酸片段。具有極高的靈敏度和特異性,可用于診斷(尤其對(duì)難以鏡檢或培養(yǎng)的蟲(chóng)種,如隱孢子蟲(chóng)、弓形蟲(chóng)、微孢子蟲(chóng)等)、蟲(chóng)種鑒定和分子流行病學(xué)研究。包括常規(guī)PCR、巢式PCR、實(shí)時(shí)熒光定量PCR等。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲(chóng)檢測(cè)必須遵循國(guó)家和國(guó)際相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范,確保檢測(cè)的科學(xué)性、規(guī)范性和結(jié)果的可靠性。主要標(biāo)準(zhǔn)包括:
1. 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(中國(guó)): * GB 14922.1-2001《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》:這是核心標(biāo)準(zhǔn)。明確規(guī)定了普通級(jí)、清潔級(jí)、SPF級(jí)和無(wú)菌級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)要求、檢測(cè)項(xiàng)目(必須檢測(cè)和必要時(shí)檢測(cè)的寄生蟲(chóng)種類(lèi))、檢測(cè)程序(取樣數(shù)量、頻率、方法)以及結(jié)果判定規(guī)則。最新版本已
證書(shū)編號(hào):241520345370
證書(shū)編號(hào):CNAS L22006
證書(shū)編號(hào):ISO9001-2024001
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