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腹瀉性貝類毒素（DSP）檢測

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發(fā)布時間：2025-07-21 07:56:49 更新時間：2025-07-20 07:56:49

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作者：中科光析科學技術(shù)研究所檢測中心

腹瀉性貝類毒素（DSP）檢測

腹瀉性貝類毒素（Diarrhetic Shellfish Poisoning，簡稱DSP）是一類在海洋貝類中積累的脂溶性毒素，主要由某些有害藻類（如甲藻屬的Dinophysis和Prorocentrum）產(chǎn)生。這些毒素包括奧卡達酸（okadaic acid）、鰭藻毒素（dinophysistoxins）及其衍生物，能通過食物鏈進入人類食用的貝類中（如蛤蜊、牡蠣、扇貝和貽貝）。攝入被DSP污染的貝類后，人類可能在數(shù)小時內(nèi)出現(xiàn)急性腸胃癥狀，包括嚴重腹瀉、嘔吐、腹痛和惡心，嚴重時可導致脫水和電解質(zhì)紊亂。DSP事件在全球范圍內(nèi)頻發(fā)，尤其在海藻赤潮期間，對食品安全和公眾健康構(gòu)成重大威脅。因此，建立高效的DSP檢測體系至關(guān)重要，不僅能預防食物中毒事件，還能支持水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的監(jiān)管和國際貿(mào)易的合規(guī)性。本檢測涉及對貝類樣本中的毒素含量進行定量分析，確保其低于安全閾值（通常在160 μg/kg貝類組織以下）。檢測過程需嚴格遵循科學原理，覆蓋從樣本采集到結(jié)果報告的完整流程，以保障消費者的安全和行業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

檢測項目

腹瀉性貝類毒素（DSP）檢測的核心項目包括對貝類樣本中特定毒素成分的定性和定量分析。這些毒素主要包括：奧卡達酸（okadaic acid, OA）、鰭藻毒素-1（dinophysistoxin-1, DTX-1）和鰭藻毒素-2（dinophysistoxin-2, DTX-2），以及它們的酯類衍生物。檢測項目涵蓋貝類樣本的來源識別（如不同種類貝類的組織、如肝胰腺或整體制備）、毒素總量測定（以μg/kg為單位），以及毒素轉(zhuǎn)化風險評估（例如酯類毒素在人體內(nèi)水解為活性形式）。檢測范圍通常包括新鮮、冷凍或加工貝類產(chǎn)品，要求樣本具有代表性（如批量采樣），并評估毒素的穩(wěn)定性與生物可利用性。最終，項目輸出包括毒素濃度報告、是否超標判定（基于國際安全限值）和風險評估建議，確保符合食品安全法規(guī)。

檢測儀器

腹瀉性貝類毒素（DSP）檢測中常用的儀器包括高效液相色譜儀（HPLC）、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（LC-MS/MS）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）讀板器和生物傳感器系統(tǒng)。HPLC用于毒素分離和初步定量，配備紫外檢測器（UV）或熒光檢測器以增強靈敏度；LC-MS/MS是當前金標準儀器，能提供高分辨率質(zhì)譜數(shù)據(jù)，準確識別和量化低至0.1 μg/kg的毒素水平，尤其適合復雜樣本基質(zhì)。ELISA設備則用于快速篩查，基于抗體-抗原反應，可實現(xiàn)高通量檢測，但需結(jié)合標準品校準。輔助儀器包括離心機（用于樣本均質(zhì)和分離）、固相萃?。⊿PE）裝置（用于毒素純化和富集）、以及凍干機和氮吹儀（用于樣本前處理）。這些儀器需定期校準和維護，以確保數(shù)據(jù)準確性和重現(xiàn)性，現(xiàn)代實驗室還整合自動化系統(tǒng)以提高效率。

檢測方法

腹瀉性貝類毒素（DSP）檢測方法主要包括提取、純化和分析三個步驟，常見方法有化學分析法、生物學法和免疫學法。首先，樣本前處理涉及貝類組織勻漿（如使用甲醇或乙腈提取毒素），固相萃取（SPE）技術(shù)用于去除干擾雜質(zhì)（如脂類和蛋白質(zhì)）。核心檢測方法包括：1. 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）：作為首選方法，通過色譜分離毒素后，質(zhì)譜進行多反應監(jiān)測（MRM），提供高特異性定量結(jié)果；2. 高效液相色譜法（HPLC）：結(jié)合紫外或熒光檢測，適用于常規(guī)實驗室；3. 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）：使用特異性抗體進行快速定性篩查，適合現(xiàn)場檢測；4. 小鼠生物試驗（MBT）：傳統(tǒng)方法，通過注射提取物觀察小鼠癥狀，但正被替代因倫理問題。方法優(yōu)化包括加標回收率測試（確保準確性）和質(zhì)量控制（如使用內(nèi)標物），整個過程需在1-2天內(nèi)完成，靈敏度達ng/g級別。

檢測標準

腹瀉性貝類毒素（DSP）檢測需嚴格遵守國內(nèi)外標準，確保結(jié)果的可比性和法律效力。國際標準包括：ISO 28540:2011《貝類中脂溶性毒素的測定—LC-MS法》，規(guī)定了LC-MS/MS的詳細流程；歐盟標準（EC）No 853/2004 附件中設定了DSP的最大殘留限值（MRL為160 μg/kg貝類）。中國國家標準（GB）如GB 5009.212-2016《食品安全國家標準動物性食品中腹瀉性貝類毒素的測定》，詳述了HPLC和LC-MS/MS方法；GB 2763-2021則制定了安全限量要求。行業(yè)標準如AOAC Official Method 2011.25（基于LC-MS/MS）和FDA貝類監(jiān)測指南，強調(diào)樣本采集、實驗室認證和報告格式。檢測需通過ISO/IEC 17025實驗室認可，包括定期能力驗證（如參加國際比對測試），以確保數(shù)據(jù)的可靠性和全球貿(mào)易合規(guī)性。