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苯硫噠唑檢測

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發(fā)布時間：2025-07-19 11:16:18 更新時間：2025-07-18 11:16:19

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

苯硫噠唑檢測概述

苯硫噠唑（Fenbendazole），作為一種廣譜苯并咪唑類抗蠕蟲藥物，廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)領(lǐng)域，治療家畜、家禽體內(nèi)的線蟲、絳蟲及吸蟲感染。其在動物源性食品（如肉類、內(nèi)臟、乳制品、蜂蜜等）中的殘留問題日益受到全球食品安全監(jiān)管機(jī)構(gòu)的關(guān)注。過量的苯硫噠唑殘留可能對人體健康構(gòu)成潛在風(fēng)險，如產(chǎn)生肝毒性、生殖毒性或誘導(dǎo)寄生蟲耐藥性。因此，建立準(zhǔn)確、靈敏、高效的苯硫噠唑檢測方法，嚴(yán)格監(jiān)控其在動物性食品及環(huán)境中的殘留水平，是保障食品安全、維護(hù)消費(fèi)者健康、促進(jìn)國際貿(mào)易順暢進(jìn)行的核心環(huán)節(jié)。各國及國際組織均制定了嚴(yán)格的殘留限量（MRL）標(biāo)準(zhǔn)，這使得針對苯硫噠唑及其主要代謝物（如奧芬達(dá)唑砜、奧芬達(dá)唑亞砜）的檢測技術(shù)成為食品安全與質(zhì)量控制領(lǐng)域的關(guān)鍵任務(wù)。

核心檢測項(xiàng)目

苯硫噠唑檢測的核心目標(biāo)物主要包括：

1. 苯硫噠唑原藥 (Fenbendazole): 檢測其未代謝形態(tài)的殘留量。

2. 主要代謝物: * 奧芬達(dá)唑砜 (Fenbendazole sulfone): 苯硫噠唑在體內(nèi)氧化代謝的主要產(chǎn)物之一，通常具有較長的半衰期，是重要的殘留監(jiān)控指標(biāo)。 * 奧芬達(dá)唑亞砜 (Fenbendazole sulfoxide / Oxfendazole): 另一個重要的中間代謝產(chǎn)物，也具有抗寄生蟲活性，其殘留水平同樣受到嚴(yán)格監(jiān)管。

3. 其他相關(guān)代謝物: 根據(jù)特定法規(guī)或監(jiān)測需求，有時也包括其他次要代謝物。

檢測基質(zhì)覆蓋廣泛，主要包括：

* 動物組織（肌肉、肝臟、腎臟、脂肪） * 乳及乳制品（牛奶、奶粉、奶酪） * 蛋及蛋制品 * 蜂蜜 * 飼料 * 環(huán)境樣品（水、土壤）

關(guān)鍵檢測儀器

現(xiàn)代苯硫噠唑殘留分析主要依賴高度靈敏和特異性的聯(lián)用儀器技術(shù)，常用的核心設(shè)備包括：

1. 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀 (LC-MS/MS): * 色譜系統(tǒng) (LC): 高效液相色譜 (HPLC) 或超高效液相色譜 (UPLC)，通常使用反相C18色譜柱進(jìn)行目標(biāo)物分離。流動相常用甲醇/乙腈與含甲酸或乙酸銨的水溶液梯度洗脫。 * 質(zhì)譜檢測器 (MS/MS): 三重四極桿質(zhì)譜是主流選擇，采用多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM) 模式進(jìn)行檢測。其優(yōu)勢在于高靈敏度、高選擇性、能同時檢測母體化合物及其代謝物、并能提供確證信息。

2. 氣相色譜-質(zhì)譜儀 (GC-MS): * 適用于某些特定情況或較早的方法標(biāo)準(zhǔn)。由于苯硫噠唑及其代謝物極性較大且熱穩(wěn)定性問題，通常需要復(fù)雜的衍生化步驟來增加其揮發(fā)性和穩(wěn)定性。

3. 前處理設(shè)備: * 固相萃取裝置 (SPE): 常用C18、HLB、MCX等柱型進(jìn)行樣品凈化和富集。 * QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, Safe) 設(shè)備: 包括離心管、萃取鹽包（硫酸鎂、醋酸鈉等）、凈化吸附劑（PSA、C18、GCB等），因其快速高效的特點(diǎn)，在動物源性食品檢測中廣泛應(yīng)用。 * 液液萃取裝置 (LLE): 傳統(tǒng)但仍在某些基質(zhì)或標(biāo)準(zhǔn)方法中使用。 * 均質(zhì)器/研磨儀: 用于組織樣品均質(zhì)。 * 高速離心機(jī): 用于相分離。 * 氮吹儀/濃縮儀: 用于溶劑蒸發(fā)和樣品濃縮。 * 分析天平、移液器、渦旋混合器、超聲波清洗器等基礎(chǔ)設(shè)備。

主要檢測方法

苯硫噠唑殘留檢測流程主要包括樣品前處理和儀器分析兩大步驟：

1. 樣品前處理: * 提取: 使用有機(jī)溶劑（如乙腈、乙酸乙酯、或含酸/堿/緩沖液的混合溶劑）將目標(biāo)物從基質(zhì)中溶解出來。QuEChERS法因其快速簡便，在多種食品基質(zhì)（尤其是動物組織、蜂蜜）中應(yīng)用廣泛。乙腈是最常用的提取溶劑。 * 凈化: 去除共提取物（脂肪、蛋白、色素、糖類等），減少基質(zhì)干擾，提高靈敏度和準(zhǔn)確性。主要方法包括： * SPE凈化: 根據(jù)基質(zhì)和目標(biāo)物性質(zhì)選擇合適的SPE小柱（如C18除脂、MCX除堿性干擾、PSA除酸和糖）。 * QuEChERS分散SPE凈化 (dSPE): 在QuEChERS提取后，上清液中加入吸附劑混合物（PSA、C18、GCB等）進(jìn)行凈化。 * 液液分配/冷凍除脂: 利用正己烷等非極性溶劑去除脂肪，或低溫冷凍離心去除脂肪。 * 衍生化 (GC-MS專用): 對目標(biāo)物進(jìn)行硅烷化等衍生化處理，提高其在GC上的響應(yīng)。

2. 儀器分析: * LC-MS/MS方法 (首選): * 色譜分離：通常在反相色譜柱上進(jìn)行。 * 質(zhì)譜檢測：采用ESI或APCI電離源（ESI+模式為主），選擇母離子，碰撞誘導(dǎo)解離后選擇特征子離子進(jìn)行MRM監(jiān)測。需要為每個目標(biāo)物（原藥及代謝物）設(shè)定至少一對特征母離子/子離子對用于定量，一對用于定性確證。 * GC-MS方法: * 色譜分離：在毛細(xì)管色譜柱上進(jìn)行。 * 質(zhì)譜檢測：通常采用電子轟擊電離 (EI)，選擇特征離子進(jìn)行選擇離子監(jiān)測 (SIM) 或全掃描模式。

3. 定性與定量分析: * 定性: 根據(jù)目標(biāo)物在色譜柱上的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)品一致，且兩對特征離子對的豐度比在允許偏差范圍內(nèi)（通?！?0-30%）。 * 定量: 采用外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法（同位素內(nèi)標(biāo)如 ¹³C 或 ²H 標(biāo)記的苯硫噠唑或其代謝物為最佳選擇，可有效校正基質(zhì)效應(yīng)和回收率損失）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品中目標(biāo)物的含量。

重要檢測標(biāo)準(zhǔn)

苯硫噠唑殘留檢測需依據(jù)國內(nèi)外權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)方法或指南進(jìn)行，確保結(jié)果的可比性、準(zhǔn)確性和法律效力。主要標(biāo)準(zhǔn)包括：

1. 中國國家標(biāo)準(zhǔn) (GB): * GB 31658.17-2021: 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法》 - 雖然標(biāo)題未提及苯并咪唑類，但部分同類標(biāo)準(zhǔn)方法也適用于苯硫噠唑或其有共同檢測要求的項(xiàng)目（需查閱具體標(biāo)準(zhǔn)適用范圍）。 * GB/T XXXX-XXXX：專門針對動物源性食品中苯并咪唑類藥物（通常包括苯硫噠唑及其代謝物）殘留量的測定通常有具體標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)號會更新，需查詢最新有效版本），常用LC-MS/MS法。

2. 中國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) (NY): * NY/T XXXX-XXXX：例如《動物源食品中苯并咪唑類藥物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對畜禽、水產(chǎn)品、蜂蜜等中苯硫噠唑等殘留有詳細(xì)規(guī)定。

3. 國際標(biāo)準(zhǔn): * AOAC Official Methods: 如 AOAC Official Method 2007.01 (Determination of Benzimidazole Residues... LC-MS/MS) 是廣泛認(rèn)可的國際方法之一。 * EN/CEN Standards: 歐盟標(biāo)準(zhǔn)化委員會發(fā)布的相關(guān)檢測標(biāo)準(zhǔn)。

4. 主要貿(mào)易國/地區(qū)法規(guī)及配套方法: * 歐盟 (EU): * 法規(guī)基礎(chǔ)：歐盟委員會法規(guī) (EU) No 37/2010 (關(guān)于動物源性食品中藥理活性物質(zhì)的殘留限量)。 * 參考方法：歐盟基準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室 (EURLs) 發(fā)布的指導(dǎo)方針和驗(yàn)證方法（?；贚C-MS/MS），如EURL for Residues of Veterinary Medicines推薦的方法。 * 美國: * 法規(guī)：FDA CFR Title 21。 * 方法：FDA實(shí)驗(yàn)室操作手冊或USDA FSIS方法指南中可能包含相關(guān)方法。 * 日本: * 肯定列表制度 (Positive List System)。 * 官方方法：如《食品中殘留農(nóng)藥、飼料添加劑及獸藥檢測方法》。

5. 殘留限量