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SHIV1157ipd3N4靜脈途徑感染恒河猴模型

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間：2025-07-25 08:14:04

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

資源中文名稱(chēng)	SHIV-1157ipd3N4靜脈途徑感染恒河猴模型
資源英文名稱(chēng)	Rhesus Macaques intravenously infected with SHIV-1157ipd3N4
疾病概述	艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)，是由人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）引起，以全身免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p害為特征的傳染性疾病，是20世紀(jì)危害人類(lèi)健康和生命最嚴(yán)重的病毒性疾病之一。自美國(guó)CDC報(bào)道首例艾滋病后，到20世紀(jì)80年代中期艾滋病發(fā)展成為一個(gè)全球性的流行病。截止2014年底，HIV已感染3690萬(wàn)人，2014年新增感染者200萬(wàn)，2014年因艾滋病死亡120萬(wàn)人。艾滋病在1985年傳入我國(guó)，截至2015年5月31日，全國(guó)歷年累計(jì)報(bào)告艾滋病530628例，其中艾滋病病人217457例，死亡167159例。艾滋病早已成為全球關(guān)注的公共衛(wèi)生和社會(huì)熱點(diǎn)問(wèn)題，艾滋病的預(yù)防與治療也成為當(dāng)代生物醫(yī)學(xué)研究的前沿?zé)狳c(diǎn)之一。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背景信息	恒河猴又名孟加拉猴、狝猴或廣西猴。學(xué)名為（Macaca mulatta），英文名rhesus macaque。分類(lèi)所屬為哺乳綱(Mammalia)，靈長(zhǎng)目(Primates)，人猴猿亞目(Anthopoidea)，猴科(Cercopithecidae)，狝猴屬(Macaca)。月經(jīng)周期為28(1-4)天，發(fā)情期為11-12個(gè)月，懷孕期163天，產(chǎn)仔期3-6個(gè)月，胎產(chǎn)仔1-2只，出生重250-380g，哺乳期3-7個(gè)月。狝猴屬中，恒河猴使用最廣。因分子生物學(xué)進(jìn)展，栗色狝猴用于生理、生化、遺傳、血型及免疫等方面的研究更多，病理研究也不少，常用于醫(yī)療和藥物實(shí)驗(yàn)等。在生物學(xué)研究方面可用于生理學(xué)、心理學(xué)、遺傳學(xué)的各種研究。在生理學(xué)研究方面可用于腦功能、血液循環(huán)、呼吸生理、生殖生理、內(nèi)分泌和老年學(xué)等各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。在醫(yī)學(xué)研究方面可用于感染人類(lèi)所特有的傳染病，特別是其他動(dòng)物不能的傳染病藥物學(xué)研究方面，預(yù)防小兒麻痹的糖丸，恒河猴是唯一的試驗(yàn)對(duì)象，人類(lèi)避孕藥物的研究，用恒河猴作試驗(yàn)是極為理想的，此外，恒河猴還常用于放射病出血和骨髓移植的實(shí)驗(yàn)。（一）傳染病學(xué)研究（二）藥理學(xué)和毒理學(xué)研究（三）生殖生理研究（四）口腔醫(yī)學(xué)研究（五）行為學(xué)和高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)研究（六）營(yíng)養(yǎng)、代謝研究（七）老年病研究（八）器官移植和眼科研究（九）內(nèi)分泌病和畸胎學(xué)研究（十）腫瘤學(xué)和環(huán)保研究 20世紀(jì)60年代出版的《狝猴文獻(xiàn)錄》中，涉及論文的多達(dá)五百余篇；在12種狝猴中，使用栗色狝猴的幾乎占一半；試加分析，解剖文章占半數(shù)，生理學(xué)和生態(tài)學(xué)其次，再次是分類(lèi)、地理分布、胚胎、進(jìn)化、遺傳和生化病理各有二十余篇，最少的是古生物和畜養(yǎng)、管理的文章。
模型制作方法	1、實(shí)驗(yàn)用病毒：感染毒株為SHIV-1157ipd3N4，中國(guó)恒河猴PBMCs滴定TCID50滴度為5×10² TCID₅₀/mL。 2、感染動(dòng)物：選用體重4-6kg的SPF恒河猴。實(shí)驗(yàn)前體檢無(wú)異常，必須排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆轉(zhuǎn)錄D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴細(xì)胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相關(guān)的4種基因（Mamu-A01、Mamu-A02、Mamu-B08、Mamu-B17）篩查結(jié)果為陰性。所有感染動(dòng)物必須在ABSL-3室中進(jìn)行。 3、感染方法：10只恒河猴隨機(jī)分為6個(gè)劑量組，由10-1至10-6，分別經(jīng)后肢靜脈感染稀釋好的病毒液1mL。G1005V、G1006V、G1007V（10-1 ，50TCID₅₀），G1008V、G1009V 、G1010V（10-2，5TCID₅₀），G1011V、G1012V、G1013V（10-3，0.5TCID₅₀），G1014V（10-4，0.05TCID₅₀）。 4、 SHIV-1157ipd3N4靜脈感染猴樣品采集和指標(biāo)測(cè)定：在感染前和感染后7、14、21、28、42、56、70及84d采集EDTA抗凝血4mL，分別測(cè)定血常規(guī)、血漿病毒載量、CD4+/CD8+、CD4+細(xì)胞絕對(duì)數(shù)和血漿結(jié)合抗體水平。 5、 SHIV-1157ipd3N4靜脈感染猴血漿病毒載量的測(cè)定：TRIzol法提取血漿中病毒RNA，Quantitect SYBR Green RT-PCR Kit測(cè)定血漿病毒RNA載量。 6、 SHIV-1157ipd3N4靜脈感染猴外周血CD4+/CD8+比值及絕對(duì)數(shù)測(cè)定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗體標(biāo)記EDTA抗凝全血淋巴細(xì)胞，流式細(xì)胞儀測(cè)定CD4+/CD8+比值，并根據(jù)血常規(guī)結(jié)果，計(jì)算出CD4+T細(xì)胞絕對(duì)數(shù)。 7、 SHIV-1157ipd3N4靜脈感染恒河猴外周血總結(jié)合抗體滴度檢測(cè)：恒河猴血漿樣品滅活后系列稀釋?zhuān)?/font>“人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法）”檢測(cè)交叉性體液免疫反應(yīng)，高于Cut-off值的最大血漿稀釋度定義為SHIV特異性總結(jié)合抗體滴度
動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)與驗(yàn)證	通過(guò)靜脈途徑，病毒直接感染血液中的靶細(xì)胞，制備靜脈途徑艾滋病恒河猴感染模型，用于艾滋病研究。
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