1、 實(shí)驗(yàn)用病毒：感染毒株SHIV-1157ipd3N4，病毒原液滴度為1×10⁶ TCID₅₀/mL（TZM-bl細(xì)胞滴定）。

2、感染動物：選用體重4-6kg的SPF恒河猴。實(shí)驗(yàn)前體檢無異常，必須排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆轉(zhuǎn)錄D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴細(xì)胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相關(guān)的4種基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）篩查結(jié)果為陰性。所有感染動物必須在ABSL-3室中進(jìn)行。

3、 感染方法：將麻醉好的實(shí)驗(yàn)猴放在操作臺上，動物采取俯臥位，后肢抬高，暴露陰道口。用2mL預(yù)冷的無菌PBS清洗陰道。再將稀釋好的適當(dāng)濃度的病毒液1mL緩慢推入。實(shí)驗(yàn)猴保持此姿勢30min。

4、 SHIV-1157ipd3N4陰道感染猴樣品采集和指標(biāo)測定：感染采取小量多次的方法,共感染11次。前3次使用20TCID₅₀的SHIV1157ipd3N4病毒,后8次使用10TCID₅₀的病毒，間隔4-8d，進(jìn)行陰道感染。在每次感染前及11次感染結(jié)束后定期采EDTA抗凝血3ml，分別測定CD348及血漿病毒載量。

5、 SHIV-1157ipd3N4陰道感染猴血漿病毒載量的測定：提取EDTA抗凝血漿中病毒RNA,使用SYBR

Green I 實(shí)時熒光定量RT-PCR方法測定血漿病毒載量。

6、 SHIV-1157ipd3N4陰道感染猴外周血CD4+/CD8+比值及絕對數(shù)測定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗體標(biāo)記EDTA抗凝全血淋巴細(xì)胞，流式細(xì)胞儀測定CD4+/CD8+比值，并根據(jù)血常規(guī)結(jié)果，計算出CD4+T細(xì)胞絕對數(shù)