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A/Anhui/1/2013(H7N9)滴鼻途徑感染BALB/c小鼠模型

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

資源中文名稱

A/Anhui/1/2013(H7N9)滴鼻途徑感染BALB/c小鼠模型

資源英文名稱

A/Anhui/1/2013(H7N9) virus intranasally infected BALB/c murine model

疾病概述

2013 年3 月31 日，依據(jù)《國(guó)際衛(wèi)生條例（2005）》，中國(guó)政府報(bào)告上海和安徽發(fā)現(xiàn)3 例人感染新型甲型H7N9 禽流感病毒（以下簡(jiǎn)稱H7N9）病例。在隨后的幾個(gè)月內(nèi)，以華東地區(qū)為代表的我國(guó)多個(gè)省市陸續(xù)確診并報(bào)道多例H7N9禽流感病毒感染人造成重癥肺炎甚至死亡的病例，這是世界首次發(fā)現(xiàn)的新型重配H7N9禽流感病毒所致的人感染疫情，引起了全球廣泛關(guān)注。 H7N9禽流感病毒是由H7 的HA 基因，N9 的NA 基因以及H9N2 病毒的6 個(gè)內(nèi)部基因片段重配而成的新型病毒。對(duì)目前已公布了全基因組的若干H7N9禽流感患者分離株的序列分析結(jié)果顯示，該病毒具有與之前其他亞型甲型流感病毒類似的遺傳特征，包括對(duì)禽類低致病性，感染哺乳動(dòng)物的能力增強(qiáng)，對(duì)金剛烷胺類抗病毒藥物耐藥，以及對(duì)神經(jīng)氨酸酶抑制劑（如奧司他韋和扎那米韋）敏感。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背景信息

小鼠由于繁殖周期短、遺傳背景均一、個(gè)體差異小等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛用作流感病毒研究的動(dòng)物模型，不僅有完備的檢測(cè)試劑，還有相應(yīng)的基因敲除、轉(zhuǎn)基因小鼠可用于機(jī)制方面的研究。小鼠多表達(dá)禽源流感病毒α2,3SA受體，人源流感病毒α2,6SA受體較少，曾局限的認(rèn)為小鼠較適合用于α2,3SA受體結(jié)合的流感病毒研究，后有研究發(fā)現(xiàn)受體特異性并不影響某些病毒對(duì)小鼠的致病力和能力。

制作流感病毒感染動(dòng)物模型多應(yīng)用SPF級(jí)雌性BALB/c小鼠，4-6周齡。

模型制作方法

病毒株為A/Anhui/1/2013 (H7N9)，BALB/c小鼠經(jīng)過(guò)輕度麻醉后滴鼻感染病毒。小鼠感染后觀察14天，監(jiān)測(cè)存活率及體重變化率。感染后分時(shí)間段安樂(lè)小鼠，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)收集相同數(shù)量小鼠肺、脾、腦、心等組織，進(jìn)行病毒滴度測(cè)定和組織病理學(xué)檢查。

模型表型數(shù)據(jù)

小鼠感染H7N9病毒后的存活情況如圖1A所示，其中接種10⁶ TCID₅₀病毒的小鼠14天內(nèi)全部存活，而10⁷或10⁸ TCID₅₀病毒對(duì)小鼠的致死率分別達(dá)20%和60%。小鼠感染10⁶ TCID₅₀病毒后，第2天開始出現(xiàn)體重下降的現(xiàn)象，第9天體重降至最低，僅為攻毒前的71.1%，隨后體重便逐漸上升直至完全恢復(fù)（圖1B及表1）。此外，部分小鼠感染后第3天開始出現(xiàn)豎毛現(xiàn)象，第4天時(shí)所有小鼠均出現(xiàn)并持續(xù)至感染后第14天（圖2及表1）。

圖1 BALB/c小鼠感染H7N9病毒后的存活率及體重變化情況。(A)小鼠分別感染10⁸, 10⁷, 或10⁶ TCID₅₀的H7N9病毒后的存活率。(B) 小鼠感染10⁶ TCID₅₀的H7N9病毒后的體重下降情況。

圖2 BALB/c小鼠感染H7N9病毒后的臨床癥狀

表1 BALB/c小鼠感染10⁶ TCID₅₀的H7N9病毒后的臨床表現(xiàn)

感染后天數(shù)	臨床表現(xiàn)
感染后天數(shù)	體重下降^#	豎毛^#	死亡^#
1	3/10	0/10	0/10 (0%)
2	8/10	0/10	0/10 (0%)
3	9/10	7/10	0/10 (0%)
5	8/10	10/10	0/10 (0%)
7	8/10	10/10	0/10 (0%)