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抗菌安全性能評價（抑菌圈法）檢測

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發(fā)布時間：2025-08-18 23:29:28 更新時間：2025-08-17 23:29:28

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

抗菌安全性能評價（抑菌圈法）檢測概述

抗菌安全性能評價是評估材料、產(chǎn)品或制劑在抑制或殺滅特定微生物方面能力的重要手段，尤其在醫(yī)療用品、紡織品、食品包裝、日化產(chǎn)品及建筑建材等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價值。其中，抑菌圈法（Zone of Inhibition Method）作為最經(jīng)典、應(yīng)用最廣泛的體外抗菌測試方法之一，因其操作簡便、結(jié)果直觀、成本較低而被廣泛采納。該方法通過將待測樣品置于接種有目標(biāo)菌種的瓊脂培養(yǎng)基表面，經(jīng)過一定時間的培養(yǎng)后，觀察樣品周圍是否形成無菌生長的透明區(qū)域，即“抑菌圈”，從而定性或半定量評估其抗菌活性。抑菌圈的大小與樣品的抗菌能力呈正相關(guān)，圈越大，表明抗菌效果越強(qiáng)。該方法不僅能用于篩選新型抗菌材料，還能為產(chǎn)品安全性和有效性提供科學(xué)依據(jù)，是抗菌性能檢測中的核心環(huán)節(jié)。隨著對健康安全要求的不斷提高，抑菌圈法已成為質(zhì)量控制、產(chǎn)品認(rèn)證及科研開發(fā)中不可或缺的技術(shù)工具。

主要檢測項目

抗菌安全性能評價的檢測項目主要包括：

對革蘭氏陽性菌（如金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus）的抑制能力
對革蘭氏陰性菌（如大腸桿菌Escherichia coli）的抑制能力
對抗真菌菌種（如白色念珠菌Candida albicans）的抑制能力
對耐藥菌株（如MRSA，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌）的抗菌效果
抗菌持久性與釋放速率（長期抗菌性能評估）

常用檢測儀器

抑菌圈法檢測需配備以下專業(yè)儀器：

恒溫培養(yǎng)箱：用于提供35–37℃恒溫環(huán)境，確保細(xì)菌正常生長與反應(yīng)。
超凈工作臺：用于無菌操作，防止樣品和培養(yǎng)基污染。
電子天平：精確稱量樣品及培養(yǎng)基成分，確保實(shí)驗重復(fù)性。
移液槍及槍頭：用于精確移取菌液、樣品溶液等。
瓊脂平板培養(yǎng)皿：標(biāo)準(zhǔn)直徑為90mm的無菌培養(yǎng)皿，內(nèi)含營養(yǎng)瓊脂或特定選擇性培養(yǎng)基。
游標(biāo)卡尺或數(shù)字化圖像分析系統(tǒng)：用于測量抑菌圈直徑，提高測量精度。
紫外燈（用于無菌操作區(qū)域）：輔助滅菌與環(huán)境消毒。

檢測方法流程

抑菌圈法的標(biāo)準(zhǔn)檢測流程如下：

菌種準(zhǔn)備：選用標(biāo)準(zhǔn)菌株（如ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株），在適宜培養(yǎng)基中活化并制備成標(biāo)準(zhǔn)濃度菌懸液（通常為1×10?–1×10? CFU/mL）。
培養(yǎng)基制備：將營養(yǎng)瓊脂或特定培養(yǎng)基熔化后冷卻至約45–50℃，倒入無菌培養(yǎng)皿，靜置凝固。
接種菌液：采用涂布法或傾注法將菌懸液均勻涂布于瓊脂表面，保證菌體分布均勻。
樣品放置：將待測樣品（如濾紙片、片狀材料、溶液滴加等）置于已接種的瓊脂表面，確保與培養(yǎng)基緊密接觸。
培養(yǎng)：將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中，于35–37℃培養(yǎng)18–24小時。
抑菌圈測量：取出培養(yǎng)皿，觀察并測量抑菌圈直徑（單位：mm），記錄結(jié)果。若無抑菌圈，則標(biāo)記為0。
數(shù)據(jù)處理：計算平均抑菌圈直徑，結(jié)合對照組（無樣品或陰性對照）進(jìn)行比較，評估抗菌效力。

檢測標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)

抑菌圈法的檢測需遵循相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)或國際規(guī)范，確保結(jié)果的科學(xué)性與可比性。主要參考標(biāo)準(zhǔn)包括：

GB/T 21510-2008《紡織品抗菌性能的評定第2部分：抑菌圈法》：適用于紡織品抗菌性能的測試。
ISO 20743:2013《Textiles — Determination of antibacterial activity of ile products》：國際標(biāo)準(zhǔn)，涵蓋多種紡織品抗菌測試方法。
ASTM E2149-13《Standard Test Method for Determination of Antimicrobial Activity of Materials》：美國材料與試驗協(xié)會標(biāo)準(zhǔn)，用于評估材料的抗菌性能。
YY/T 0188-2019《醫(yī)用口罩用材料抗菌性能評價方法》：針對醫(yī)用防護(hù)材料的抗菌檢測要求。
GB/T 27749-2011《抗菌涂料（釉）抗菌性能評價方法》：適用于涂料類抗菌材料的檢測。

以上標(biāo)準(zhǔn)對菌種選擇、培養(yǎng)基類型、接種濃度、培養(yǎng)時間、抑菌圈測量方法及結(jié)果判定均有明確規(guī)定，確保檢測過程的統(tǒng)一性與權(quán)威性。

注意事項與局限性

盡管抑菌圈法具有操作簡便、結(jié)果直觀的優(yōu)點(diǎn)，但在實(shí)際應(yīng)用中仍需注意以下幾點(diǎn)：

抑菌圈大小受樣品擴(kuò)散能力影響，若樣品在瓊脂中難以擴(kuò)散，可能導(dǎo)致結(jié)果偏低。
測試僅反映體外抗菌活性，不能完全代表實(shí)際使用中的抗菌效果。
需嚴(yán)格控制無菌操作，避免污染影響結(jié)果。
不同菌株的敏感性存在差異，應(yīng)選擇代表性菌種進(jìn)行測試。
長期抗菌性能需結(jié)合動態(tài)釋放實(shí)驗或周期性測試進(jìn)行綜合評估。

綜上所述，抑菌圈法作為抗菌安全性能評價的核心方法，結(jié)合規(guī)范的檢測儀器、標(biāo)準(zhǔn)流程與權(quán)威檢測標(biāo)準(zhǔn)，能夠有效評估材料的抗菌能力，為產(chǎn)品安全認(rèn)證、研發(fā)優(yōu)化與市場準(zhǔn)入提供重要數(shù)據(jù)支持。