您現(xiàn)在的位置：首頁 > 檢測項目 > 其他檢測

重復(fù)接觸全身毒性試驗（亞慢性全身毒性）檢測

1對1客服專屬服務(wù)，免費制定檢測方案，15分鐘極速響應(yīng)

可選形式：電子報告紙質(zhì)報告

可選語言：中文報告英文報告

發(fā)布時間：2025-08-01 15:08:40 更新時間：2025-07-31 15:08:40

點擊：0

作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心

重復(fù)接觸全身毒性試驗（亞慢性全身毒性）檢測概述

重復(fù)接觸全身毒性試驗（Repeated Dose Systemic Toxicity Study），特別是亞慢性全身毒性試驗（Subchronic Systemic Toxicity Study），是毒理學(xué)安全評價體系中至關(guān)重要的環(huán)節(jié)。該試驗旨在評估受試物質(zhì)在中等暴露時長（通常在14天至90天之間，常見的為28天或90天，具體取決于法規(guī)要求和產(chǎn)品類型）內(nèi)，通過特定途徑（如口服、吸入、皮膚接觸或注射）反復(fù)接觸后，對生物體（通常選用嚙齒類和非嚙齒類實驗動物）產(chǎn)生的潛在不良健康影響。其核心目標(biāo)是識別在單次急性毒性試驗中可能無法觀察到的累積毒性效應(yīng)、靶器官毒性、生理功能變化、恢復(fù)能力以及潛在的致癌性初步跡象（如在90天研究中）。這類試驗對于評估藥品、醫(yī)療器械、化學(xué)品、農(nóng)藥、化妝品原料等產(chǎn)品的安全性，預(yù)測人類長期或重復(fù)使用時的潛在風(fēng)險，以及制定安全暴露限值（如NOAEL - 未觀察到有害作用水平）具有不可替代的作用。

主要檢測項目

亞慢性全身毒性試驗涵蓋廣泛的觀察和檢測終點，以全面評估受試物質(zhì)對機體多系統(tǒng)和器官的影響，主要包括：

1. 臨床觀察： 每日觀察動物的死亡率、發(fā)病情況、行為活動（如運動協(xié)調(diào)性、反應(yīng)性）、精神狀態(tài)（如冷漠、興奮）、皮毛狀態(tài)、眼睛狀況、分泌物（如唾液、鼻液）以及排泄物（糞便性狀、尿量顏色）等。

2. 體重與攝食/飲水： 定期（通常每周1-2次或更頻繁）測量動物體重、食物消耗量和飲水量，計算食物利用率（體重增長/食物消耗）。這是評價總體健康狀況和潛在毒性的敏感指標(biāo)。

3. 功能觀察組合（Functional Observational Battery, FOB）： 在試驗期間特定時間點（如給藥前、給藥中期、給藥末期）進(jìn)行系統(tǒng)的神經(jīng)行為學(xué)檢查，評估感覺、運動功能、自主神經(jīng)系統(tǒng)活動和中樞神經(jīng)系統(tǒng)狀態(tài)。

4. 眼科檢查： 在試驗開始前和結(jié)束時，使用檢眼鏡等設(shè)備對動物進(jìn)行眼睛檢查，評估受試物對眼睛的潛在刺激性或毒性。

5. 血液學(xué)檢查： 試驗結(jié)束時采集血液樣本，檢測紅細(xì)胞、白細(xì)胞及其分類計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積、血小板計數(shù)、凝血時間等，評估造血系統(tǒng)功能和凝血狀態(tài)。

6. 臨床生化檢查： 試驗結(jié)束時采集血清或血漿樣本，檢測電解質(zhì)（鈉、鉀、鈣、氯、磷等）、糖、脂類、肝功指標(biāo)（如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶/ALT、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶/AST、堿性磷酸酶/ALP、總膽紅素、總蛋白、白蛋白）、腎功指標(biāo)（如尿素氮/BUN、肌酐/CREA、尿酸）、重要酶類（如乳酸脫氫酶/LDH、肌酸激酶/CK）等，評估肝、腎、胰腺等主要器官功能及代謝狀態(tài)。

7. 尿液分析： 試驗結(jié)束時收集尿液樣本，進(jìn)行外觀、體積、比重、pH值、蛋白質(zhì)、葡萄糖、酮體、膽紅素、尿膽原、潛血、沉渣鏡檢（細(xì)胞、管型、結(jié)晶等）分析，輔助評估腎功能和泌尿系統(tǒng)狀況。

8. 大體解剖： 試驗結(jié)束時安樂死動物，進(jìn)行系統(tǒng)的大體剖檢，觀察所有器官和組織的異常（如顏色、大小、質(zhì)地、腫塊、粘連、積液等），并準(zhǔn)確稱量主要器官（腦、心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、性腺等）的絕對重量，計算相對重量（器官重量/體重），作為器官毒性的重要指示。

9. 組織病理學(xué)檢查： 這是亞慢性毒性試驗的核心終點。收集所有重要的器官和組織（通常包括上述稱重器官以及氣管、食管、胃、小腸、大腸、胰腺、膀胱、淋巴結(jié)、垂體、甲狀腺、甲狀旁腺、坐骨神經(jīng)、骨髓、皮膚、注射部位/接觸部位等），經(jīng)固定、脫水、包埋、切片、染色（如H&E染色）后，在光學(xué)顯微鏡下由病理學(xué)家進(jìn)行詳細(xì)的顯微結(jié)構(gòu)檢查，識別、描述和評估組織損傷、炎癥、增生、壞死、纖維化、腫瘤性病變等變化。這是確定靶器官毒性和作用機制的關(guān)鍵。

10. 恢復(fù)期觀察（可選，但常用于關(guān)鍵研究）： 部分動物在停止給藥后繼續(xù)飼養(yǎng)一段時間（如14天或28天），進(jìn)行相應(yīng)的觀察和檢測，以評估觀察到的毒性效應(yīng)的可逆性或持續(xù)性。

核心檢測儀器

亞慢性毒性試驗依賴于一系列精密的儀器設(shè)備來保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性：

1. 動物飼養(yǎng)與環(huán)境控制： 具有獨立通風(fēng)籠具（IVC）系統(tǒng)的動物房，配備精確的溫度、濕度、光照和通風(fēng)控制系統(tǒng)、飼養(yǎng)籠具、飲水系統(tǒng)。

2. 給藥設(shè)備： 精確的灌胃針和注射器（口服給藥）、吸入染毒設(shè)備（如全身暴露倉、頭鼻暴露系統(tǒng)）、皮膚敷貼裝置（經(jīng)皮給藥）、微量輸液泵（靜脈給藥）。

3. 體重與攝食測量： 高精度電子天平（用于動物體重、器官重量、食物重量）。

4. 血液學(xué)分析儀： 全自動血液分析儀（血細(xì)胞計數(shù)儀）、血凝分析儀。

5. 臨床生化分析儀： 全自動生化分析儀（用于血清/血漿生化指標(biāo)檢測）。

6. 尿液分析儀： 尿液干化學(xué)分析儀、尿液沉渣分析儀。

7. 眼科檢查設(shè)備： 間接檢眼鏡、裂隙燈顯微鏡。

8. 大體解剖設(shè)備： 解剖臺、手術(shù)器械套裝、電子天平（器官稱重）。

9. 組織病理學(xué)設(shè)備： 組織固定和脫水設(shè)備（如自動組織脫水機）、包埋機、切片機（石蠟切片機、冷凍切片機）、染色工作站（自動或手動）、光學(xué)顯微鏡（帶攝影系統(tǒng)）、數(shù)字玻片掃描儀、圖像分析系統(tǒng)。

10. 數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)： 實驗室信息管理系統(tǒng)（LIMS）用于采集、存儲和管理所有試驗數(shù)據(jù)。

11. 功能觀察組合工具： 各種用于評估神經(jīng)行為的標(biāo)準(zhǔn)化工具（如握力計、旋轉(zhuǎn)棒、開闊場設(shè)備、聽覺/痛覺刺激器等）。

標(biāo)準(zhǔn)檢測方法

亞慢性全身毒性試驗的實施嚴(yán)格遵循國際通用的標(biāo)準(zhǔn)化實驗程序：

1. 試驗設(shè)計： 采用隨機分組原則，設(shè)立陰性對照組（溶劑/賦形劑）、受試物組（至少3個遞增劑量組，其中高劑量應(yīng)能誘導(dǎo)明顯毒性但不導(dǎo)致過多死亡，中劑量應(yīng)能觀察到輕微毒性效應(yīng)，低劑量應(yīng)接近或高于預(yù)期人暴露量但不應(yīng)出現(xiàn)毒性 - 旨在確定NOAEL）。通常每組嚙齒類動物數(shù)≥10只/性別，非嚙齒類（如犬）≥4只/性別。試驗時長通常為28天或90天。

2. 給藥/暴露： 根據(jù)受試物的預(yù)期接觸途徑（口服灌胃、靜脈注射、皮下注射、吸入、皮膚涂抹等），按照設(shè)計好的劑量水平和頻率（通常每天一次，每周7天或5天），在標(biāo)準(zhǔn)化的條件下對動物進(jìn)行重復(fù)給藥或暴露。嚴(yán)格控制給藥體積、暴露濃度和時長。

3. 臨床觀察與記錄： 嚴(yán)格按照試驗方案規(guī)定的時間點和方法進(jìn)行所有項目的觀察和記錄，確?？陀^、準(zhǔn)確、一致。

4. 樣本采集： 在試驗結(jié)束時（及恢復(fù)期結(jié)束時）對禁食動物進(jìn)行人道安樂死，按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）采集血液、尿液，并進(jìn)行系統(tǒng)的大體解剖和組織取材。樣本需清晰標(biāo)識并妥善保存。

5. 實驗室檢測： 所有血液學(xué)、臨床生化和尿液分析均在經(jīng)過驗證的儀器上，按照既定的SOP和良好實驗室規(guī)范（GLP）要求進(jìn)行。

6. 病理學(xué)檢查： 組織病理學(xué)檢查采用“盲法”（病理學(xué)家不知曉分組信息）進(jìn)行。所有發(fā)現(xiàn)的病變均使用標(biāo)準(zhǔn)化的術(shù)語（如INHAND、STP指南）進(jìn)行描述和分級。最終進(jìn)行分組比對分析。

7. 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與評價： 對所有定量數(shù)據(jù)（體重、攝食量、器官重量、血液生化等）進(jìn)行適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)分析（如方差分析ANOVA，Dunnett's