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紫外-可見光吸收光譜檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-31 07:32:13 更新時(shí)間：2025-07-30 07:32:13

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

紫外-可見光吸收光譜檢測(cè)概述

紫外-可見光吸收光譜檢測(cè)（UV-Vis Spectroscopy）是分析化學(xué)領(lǐng)域的核心技術(shù)之一，其原理基于物質(zhì)在紫外（200-400 nm）和可見光（400-800 nm）波段對(duì)特定波長(zhǎng)光的選擇性吸收。當(dāng)入射光穿過待測(cè)樣品時(shí)，分子中的電子發(fā)生能級(jí)躍遷，吸收特定波長(zhǎng)的光子，形成特征吸收光譜。該方法具備高靈敏度（可檢測(cè)10?? mol/L濃度）、操作便捷、分析速度快等優(yōu)勢(shì)，廣泛應(yīng)用于藥物純度分析、環(huán)境污染物監(jiān)測(cè)、生化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究以及材料科學(xué)中的納米粒子表征等領(lǐng)域。其非破壞性特質(zhì)尤其適合珍貴樣本的連續(xù)檢測(cè)，是現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室不可或缺的分析工具。

檢測(cè)項(xiàng)目

紫外-可見光吸收光譜可執(zhí)行多種關(guān)鍵檢測(cè)任務(wù)，主要包括：1）濃度定量分析，如蛋白質(zhì)（通過280 nm處酪氨酸吸收）或核酸（260 nm處堿基吸收）的定量測(cè)定；2）純度驗(yàn)證，例如藥物中雜質(zhì)峰的識(shí)別；3）化學(xué)結(jié)構(gòu)分析，通過特征吸收峰鑒定共軛體系或發(fā)色團(tuán)；4）反應(yīng)進(jìn)程監(jiān)控，如酶催化反應(yīng)的實(shí)時(shí)跟蹤；5）絡(luò)合物配位研究，通過配體場(chǎng)吸收帶分析金屬配合物結(jié)構(gòu)。在環(huán)保領(lǐng)域，還可用于水體COD（化學(xué)需氧量）的快速評(píng)估。

檢測(cè)儀器

核心檢測(cè)儀器為紫外-可見分光光度計(jì)，主要由以下模塊構(gòu)成：氘燈（紫外光源）與鎢燈（可見光源）組成的雙光源系統(tǒng)，光柵或棱鏡單色器（波長(zhǎng)分辨率達(dá)0.1 nm），石英或玻璃樣品池（光程常為1 cm），光電倍增管或CCD檢測(cè)器?，F(xiàn)代儀器多配備溫控樣品室（±0.1℃精度）和自動(dòng)進(jìn)樣器，如安捷倫Cary系列、島津UV-2600等高端機(jī)型支持雙光束設(shè)計(jì)，可實(shí)時(shí)扣除溶劑背景干擾，大幅提升數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

檢測(cè)方法

標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)流程包含四個(gè)關(guān)鍵步驟：1）樣品制備，需將待測(cè)物溶解于特定溶劑（如超純水、甲醇），濃度調(diào)整至吸光度0.2-1.0區(qū)間；2）基線校正，使用空白溶劑進(jìn)行全波段掃描（通常200-800 nm）；3）光譜采集，以1 nm步進(jìn)記錄吸光度，重點(diǎn)觀測(cè)特征峰位置（λ_max）及峰形；4）數(shù)據(jù)分析，依據(jù)朗伯-比爾定律A=εlc（A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)，l為光程，c為濃度）進(jìn)行定量計(jì)算。對(duì)于復(fù)雜體系，常結(jié)合導(dǎo)數(shù)光譜或多元校正法消除基質(zhì)干擾。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

該技術(shù)遵循嚴(yán)格的國(guó)際與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，主要包括：1）藥典標(biāo)準(zhǔn)，如《美國(guó)藥典》USP ?857? 和《中國(guó)藥典》2020版通則0401規(guī)定溶出度測(cè)試方法；2）環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)，參照ISO 7887:2011水質(zhì)色度測(cè)定法；3）材料表征標(biāo)準(zhǔn)，依據(jù)ASTM E275-08描述儀器性能驗(yàn)證規(guī)范。關(guān)鍵質(zhì)控指標(biāo)涵蓋波長(zhǎng)精度（±0.3 nm）、吸光度線性（R2>0.999）及雜散光（<0.05% T）。定期需使用鈥玻璃濾光片或重鉻酸鉀溶液進(jìn)行儀器校準(zhǔn)，確保數(shù)據(jù)符合GLP實(shí)驗(yàn)室要求。