Rh檢測(cè)：保障輸血安全與妊娠健康的關(guān)鍵環(huán)節(jié)

Rh血型系統(tǒng)，尤其是D抗原（Rh因子）的檢測(cè)，是現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)中一項(xiàng)至關(guān)重要的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目。它是繼ABO血型系統(tǒng)之后，對(duì)人類輸血安全、妊娠管理及新生兒健康影響最大的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)。Rh陰性個(gè)體（缺乏D抗原）在接受Rh陽(yáng)性血液或妊娠期間若胎兒為Rh陽(yáng)性，可能產(chǎn)生抗-D抗體，導(dǎo)致嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)或新生兒溶血?。℉DN）。因此，準(zhǔn)確、靈敏、特異地檢測(cè)Rh(D)抗原狀態(tài)是臨床實(shí)驗(yàn)室的核心任務(wù)之一，直接關(guān)系到患者的生命安全和生育健康。其檢測(cè)范圍不僅限于常規(guī)的Rh(D)定型，還包括對(duì)弱D型、部分D型等變異型的鑒別，以及對(duì)已產(chǎn)生抗-D抗體患者的監(jiān)測(cè)和效價(jià)測(cè)定。

檢測(cè)項(xiàng)目

Rh檢測(cè)的核心項(xiàng)目主要包括：

• Rh(D)定型： 這是最基本且最重要的檢測(cè)項(xiàng)目，用于確定個(gè)體紅細(xì)胞表面是否存在D抗原，將其分類為Rh陽(yáng)性或Rh陰性。
• 弱D型檢測(cè)： 當(dāng)常規(guī)方法檢測(cè)為陰性或弱陽(yáng)性時(shí)，需進(jìn)一步采用更敏感的方法（如抗人球蛋白試驗(yàn)）確認(rèn)是否為弱D型（Du型）。弱D型個(gè)體作為供血者時(shí)，其血液通常視為Rh陽(yáng)性；作為受血者時(shí)，弱D型個(gè)體通常視作Rh陰性處理，需要輸注Rh陰性血。
• 部分D型檢測(cè)： 使用針對(duì)不同D抗原表位的單克隆抗體組合進(jìn)行檢測(cè)，以識(shí)別D抗原結(jié)構(gòu)存在部分缺失的個(gè)體，這類個(gè)體有產(chǎn)生抗-D抗體的風(fēng)險(xiǎn)。
• Rh表型（C, c, E, e抗原）檢測(cè)： 在特定情況下（如多次輸血患者、有生育史或有輸血反應(yīng)史的患者、抗體鑒定需要），需進(jìn)行除D抗原外的其他主要Rh抗原（C, c, E, e）的檢測(cè)。
• 抗-D抗體篩查與鑒定： 對(duì)Rh陰性個(gè)體（尤其是育齡期女性）或有輸血/妊娠史的個(gè)體進(jìn)行血清學(xué)檢查，檢測(cè)是否存在抗-D抗體。
• 抗-D抗體效價(jià)測(cè)定： 對(duì)于已檢出的抗-D抗體孕婦，需定期監(jiān)測(cè)抗體效價(jià)，評(píng)估胎兒發(fā)生溶血的風(fēng)險(xiǎn)。

檢測(cè)儀器

現(xiàn)代Rh血型檢測(cè)主要依賴以下儀器設(shè)備，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化和高通量檢測(cè)，提高準(zhǔn)確性和效率：

• 全自動(dòng)血型分析儀： 這是大型實(shí)驗(yàn)室的主流設(shè)備?？勺詣?dòng)化完成樣本分配、試劑添加、孵育、離心、結(jié)果判讀（通常采用圖像分析技術(shù)）和報(bào)告生成全過(guò)程。如瑞士達(dá)亞美（DiaMed）的ID系列、美國(guó)強(qiáng)生（Ortho）的AutoVue系列等。
• 微柱凝膠卡離心機(jī)/孵育器/判讀系統(tǒng)： 基于微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)（如DiaMed的ID卡、Bio-Rad的DG Gel卡）。專用離心機(jī)進(jìn)行離心操作，判讀系統(tǒng)或肉眼判讀凝膠柱內(nèi)紅細(xì)胞凝集情況。
• 血型血清學(xué)專用離心機(jī)： 用于試管法、玻片法的離心步驟，需配備精確的轉(zhuǎn)速和時(shí)間控制。
• 顯微鏡： 用于觀察玻片法或試管法中細(xì)微的凝集反應(yīng)。
• 恒溫水浴箱/孵育箱： 為某些檢測(cè)方法（如抗人球蛋白試驗(yàn)）提供恒定的孵育溫度。
• 酶標(biāo)儀/洗板機(jī)（用于某些ELISA法試劑盒）： 部分試劑采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行Rh分型或抗體檢測(cè)。

檢測(cè)方法

Rh血型檢測(cè)主要采用經(jīng)典的血清學(xué)方法：

• 玻片法： 最簡(jiǎn)單快捷，但靈敏度和特異性相對(duì)較低，易受環(huán)境溫度、反應(yīng)時(shí)間、判讀主觀性影響。通常僅用于初步篩查或緊急情況下的Rh(D)定型，不適合弱D檢測(cè)和抗體篩查。操作：在玻片上混合紅細(xì)胞懸液與抗-D血清，觀察是否出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集。
• 試管法： 經(jīng)典的標(biāo)準(zhǔn)方法，靈敏度高于玻片法?？伸`活選擇鹽水介質(zhì)法（檢測(cè)IgM型抗體/抗原）或添加增強(qiáng)劑（如牛血清白蛋白、低離子強(qiáng)度鹽水LISS、聚乙二醇PEG）的方法（檢測(cè)IgG型抗體/抗原）。結(jié)果判讀需離心后肉眼或顯微鏡觀察?？谷饲虻鞍自囼?yàn)（Coombs試驗(yàn)）是試管法的關(guān)鍵延伸，用于檢測(cè)弱D型、不規(guī)則抗體篩查/鑒定及交叉配血。
• 微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)： 目前最主流和最可靠的方法。將抗血清包被在微柱凝膠卡的反應(yīng)腔內(nèi)，加入紅細(xì)胞懸液，離心后根據(jù)紅細(xì)胞在凝膠中的位置判讀結(jié)果（凝集紅細(xì)胞留在凝膠上層或中間，未凝集細(xì)胞沉降至凝膠底部）。該技術(shù)靈敏度高、特異性好、結(jié)果判讀客觀清晰、易于標(biāo)準(zhǔn)化和自動(dòng)化，可同時(shí)用于抗原定型和抗體檢測(cè)（直接/間接抗人球蛋白試驗(yàn)原理）。
• 固相紅細(xì)胞吸附技術(shù)： 在微孔板孔底包被抗人球蛋白（用于抗體檢測(cè)）或特異性抗原（用于抗原定型），通過(guò)觀察紅細(xì)胞在孔底的吸附模式（棋盤狀凝集）來(lái)判讀結(jié)果。
• 分子生物學(xué)方法（基因分型）： 通過(guò)PCR技術(shù)檢測(cè)RHD基因的存在、缺失或變異。主要用于解決復(fù)雜的血清學(xué)問(wèn)題（如弱D、部分D、DEL型的精確分型）、預(yù)測(cè)胎兒Rh血型（無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷）、大量供者庫(kù)Rh分型的快速篩查、以及血清學(xué)方法無(wú)法確定的Rh陰性個(gè)體的確認(rèn)。目前主要作為血清學(xué)檢測(cè)的補(bǔ)充手段。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

Rh血型檢測(cè)必須遵循嚴(yán)格的國(guó)家、行業(yè)和國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性和可比性：

• 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：
  • 國(guó)際輸血協(xié)會(huì)（ISBT）：制定紅細(xì)胞血型系統(tǒng)的命名、抗原編號(hào)和技術(shù)指南。
  • 美國(guó)血庫(kù)協(xié)會(huì)（AABB）：《血庫(kù)和輸血服務(wù)機(jī)構(gòu)標(biāo)準(zhǔn)》是國(guó)際輸血領(lǐng)域最具影響力的標(biāo)準(zhǔn)之一，對(duì)Rh檢測(cè)的各個(gè)方面（試劑、方法、質(zhì)控、人員、記錄）都有詳盡規(guī)定。
  • 世界衛(wèi)生組織（WHO）：提供血液安全相關(guān)指南和建議。
• 國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)（中華人民共和國(guó)）：
  • 強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB）：如《全血及成分血質(zhì)量要求》（GB 18469）對(duì)血液Rh(D)定型有明確規(guī)定。
  • 衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（WS/T）：如《輸血醫(yī)學(xué)常用術(shù)語(yǔ)》（WS/T 203）、《紅細(xì)胞血型抗體鑒定技術(shù)指南》（WS/T 795）等。
  • 中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)（CNAS）：ISO 15189《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的要求》是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系的國(guó)際通用標(biāo)準(zhǔn)，國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室常依據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行認(rèn)可。
  • 國(guó)家藥典委員會(huì)：《中華人民共和國(guó)藥典》對(duì)血液制品相關(guān)檢測(cè)有規(guī)定。
• 核心要求：
  • 試劑要求： 使用國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào)的合格試劑?？?D血清需有足夠的效價(jià)和親和力，使用多克隆抗體或混合的單克隆抗體（覆蓋多個(gè)D抗原表位）。需有明確的陰陽(yáng)性對(duì)照。
  • 操作規(guī)程（SOP）： 實(shí)驗(yàn)室必須制定詳細(xì)、可操作的標(biāo)準(zhǔn)化程序文件。
  • 室內(nèi)質(zhì)控（IQC）： 每次檢測(cè)或每批檢測(cè)必須使用已知結(jié)果的陰性和陽(yáng)性（包括弱陽(yáng)性/弱D）對(duì)照樣本進(jìn)行監(jiān)控，確保檢測(cè)系統(tǒng)正常。
  • 室間質(zhì)評(píng)（EQA）： 定期參加國(guó)家級(jí)或省級(jí)臨檢中心組織的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
  • 結(jié)果判讀： 必須有明確、統(tǒng)一的判讀標(biāo)準(zhǔn)（如凝集強(qiáng)度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)），重要結(jié)果（特別是Rh陰性/弱D）需由雙人或采用不同方法復(fù)核。
  • 人員資質(zhì)與培訓(xùn)： 操作人員需具備相關(guān)專業(yè)背景，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)并考核合格。
  • 記錄保存： 所有檢測(cè)過(guò)程、結(jié)果、質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)必須完整、清晰、可追溯地記錄并保存規(guī)定年限。

  檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)證書(shū)

  

  CMA認(rèn)證

  檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書(shū)

  證書(shū)編號(hào)：241520345370

  有效期至：2030年4月15日

  

  CNAS認(rèn)可

  實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書(shū)

  證書(shū)編號(hào)：CNAS L22006

  有效期至：2030年12月1日

  

  ISO認(rèn)證

  質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書(shū)

  證書(shū)編號(hào)：ISO9001-2024001

  有效期至：2027年12月31日