磺胺二甲嘧啶(SDM)/磺胺二甲基嘧啶檢測(cè)

磺胺二甲嘧啶(Sulfadimidine, SDM)，也稱為磺胺二甲基嘧啶，是一種廣泛使用的磺胺類廣譜抗菌藥，曾大量應(yīng)用于畜牧業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中，用于預(yù)防和治療細(xì)菌性疾病以及促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。然而，SDM及其代謝物可能在動(dòng)物源性食品（如肉類、內(nèi)臟、奶制品、禽蛋、水產(chǎn)品）中殘留。長(zhǎng)期或過量攝入含有SDM殘留的食品，可能導(dǎo)致人體產(chǎn)生耐藥菌株、過敏反應(yīng)、破壞腸道菌群平衡，甚至可能對(duì)造血系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)造成損害。因此，世界各國(guó)和地區(qū)都制定了嚴(yán)格的SDM最高殘留限量(MRL)標(biāo)準(zhǔn)。為了保障食品安全、保護(hù)消費(fèi)者健康、滿足法規(guī)要求并確保貿(mào)易順利進(jìn)行，對(duì)食品、飼料、動(dòng)物組織、尿液及環(huán)境樣本中磺胺二甲嘧啶殘留進(jìn)行準(zhǔn)確、靈敏的檢測(cè)至關(guān)重要。這涉及到一系列專業(yè)的檢測(cè)項(xiàng)目、精密的儀器、可靠的方法和嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。

檢測(cè)項(xiàng)目

磺胺二甲嘧啶(SDM)檢測(cè)的主要項(xiàng)目包括：

• SDM殘留量測(cè)定： 定量測(cè)定各類樣本（肌肉、肝臟、腎臟、脂肪、牛奶、雞蛋、蜂蜜、飼料、水產(chǎn)品、尿液、環(huán)境水樣等）中SDM的具體含量。
• SDM及其相關(guān)代謝物檢測(cè)： 有時(shí)需要同時(shí)檢測(cè)SDM的主要代謝物（如N4-乙?；前范奏奏ぃ?。
• 多種磺胺類藥物多殘留篩查： SDM常與其他磺胺類藥物（如磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺間甲氧嘧啶等）一起作為“磺胺類”項(xiàng)目進(jìn)行多殘留檢測(cè)。
• 非法添加篩查： 在飼料或非法使用的獸藥中篩查SDM的存在。

檢測(cè)儀器

磺胺二甲嘧啶(SDM)的檢測(cè)高度依賴現(xiàn)代分析儀器設(shè)備，常用的核心儀器包括：

• 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS/MS)： 目前檢測(cè)SDM殘留的金標(biāo)準(zhǔn)儀器，因其具有極高的靈敏度、選擇性和準(zhǔn)確性，特別適用于復(fù)雜基質(zhì)中痕量SDM的定性和定量分析。
• 高效液相色譜儀(HPLC)： 常配備紫外檢測(cè)器(UV)或熒光檢測(cè)器(FLD)。雖然在靈敏度和抗干擾能力上遜于LC-MS/MS，但對(duì)于某些限量要求不高或基質(zhì)相對(duì)簡(jiǎn)單的樣品，仍是經(jīng)濟(jì)有效的選擇。
• 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定儀(ELISA Reader)： 基于抗原抗體特異性反應(yīng)，用于SDM的快速篩查。優(yōu)點(diǎn)是高通量、操作相對(duì)簡(jiǎn)單、成本較低，但通常作為初篩手段，陽(yáng)性結(jié)果需要用色譜或質(zhì)譜方法確認(rèn)。
• 樣品前處理設(shè)備：
  • 均質(zhì)器/組織搗碎機(jī)：用于均質(zhì)動(dòng)物組織等固體樣品。
  • 離心機(jī)：用于固液分離。
  • 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮吹儀：用于萃取液的濃縮。
  • 固相萃取(SPE)裝置或QuEChERS裝置：用于樣品提取液的凈化和富集，是去除雜質(zhì)、提高檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟。

檢測(cè)方法

磺胺二甲嘧啶(SDM)的檢測(cè)方法主要包括以下幾個(gè)步驟：

1. 樣品前處理：
   • 提取： 常用酸性乙腈、酸化甲醇、緩沖溶液等作為提取溶劑，將SDM從樣品基質(zhì)（如絞碎的肌肉、均漿的肝臟、混合的飼料、液態(tài)奶）中溶解出來(lái)。
   • 凈化： 使用固相萃取(SPE)（常用C18、HLB、MCX等柱填料）或QuEChERS方法去除脂肪、蛋白質(zhì)、色素等干擾物質(zhì)。
   • 濃縮/復(fù)溶： 將凈化后的提取液濃縮至小體積，有時(shí)需要轉(zhuǎn)換溶劑以兼容后續(xù)儀器分析。
2. 儀器分析：
   • LC-MS/MS法： 這是最主流和權(quán)威的方法。SDM經(jīng)過色譜柱（如C18反相柱）分離后，進(jìn)入三重四極桿質(zhì)譜。通過優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)（母離子、子離子、碰撞能量等），在多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式下進(jìn)行高選擇性和高靈敏度的檢測(cè)。典型離子對(duì)可能包括母離子m/z 279，子離子m/z 186, 124, 92等。
   • HPLC-UV/FLD法： SDM在色譜柱上分離后，利用其在特定紫外波長(zhǎng)（如268nm附近）下的吸收或經(jīng)衍生化后產(chǎn)生的熒光進(jìn)行檢測(cè)。該方法需要更徹底的凈化以保證特異性。
   • ELISA法： 利用包被在微孔板上的SDM抗原或抗體與待測(cè)樣品中的SDM競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)記物，通過酶催化底物顯色反應(yīng)，用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較進(jìn)行半定量或定量分析。
3. 定量與確證： 采用外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法（常用氘代SDM或其他合適的氘代磺胺作為內(nèi)標(biāo)）進(jìn)行定量。LC-MS/MS方法通過監(jiān)測(cè)多個(gè)特征離子對(duì)及其豐度比進(jìn)行確證。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

磺胺二甲嘧啶(SDM)的檢測(cè)必須遵循國(guó)家、國(guó)際或行業(yè)制定的標(biāo)準(zhǔn)方法，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性、可比性和法律效力。國(guó)內(nèi)外主要相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)包括：

• 中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB)：
  • GB 31650-2021 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》：規(guī)定了SDM在各種動(dòng)物源性食品中的MRL值（如：肌肉/脂肪/肝/腎/奶 100 μg/kg）。
  • GB/T 20759-2006 《畜禽肉中十六種磺胺類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》：包含SDM的多殘留檢測(cè)方法。
  • GB/T 21316-2007 《動(dòng)物源性食品中磺胺類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》：常用標(biāo)準(zhǔn)之一。
  • GB/T 22947-2008 《蜂蜜中十六種磺胺殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》。
  • GB/T 18932.17-2003 《蜂蜜中十六種磺胺殘留量的測(cè)定方法 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》。
  • GB/T 22950-2008 《河豚魚、鰻魚及烤鰻中十八種磺胺類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》。
• 國(guó)際/國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)：
  • 歐盟(EU)： EU Regulation No 37/2010 規(guī)定了SDM的MRL。常用參考方法如SANTE/11813/2017等指南推薦的LC-MS/MS方法。
  • 美國(guó)(US)： FDA方法如FDA PAM Vol I Sec.4.0中相關(guān)方法。
  • 日本(肯定列表制度)： 對(duì)SDM有嚴(yán)格的限量要求，檢測(cè)方法常依據(jù)《食品中殘留農(nóng)藥、獸藥及飼料添加劑檢測(cè)方法 畜產(chǎn)、水產(chǎn)食品篇》等。
  • 國(guó)際食品法典委員會(huì)(CAC)： CAC/MRL 標(biāo)準(zhǔn)。
• 行業(yè)/地方標(biāo)準(zhǔn)： SN（出入境檢驗(yàn)檢疫）、NY（農(nóng)業(yè)）、DB（地方）等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)也可能包含SDM的檢測(cè)方法。

實(shí)驗(yàn)室在選擇和執(zhí)行檢測(cè)方法時(shí)，必須嚴(yán)格遵循相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)，并通過能力驗(yàn)證、加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)（通常在70%-120%范圍內(nèi)）、平行樣測(cè)定、使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(CRM)等方式進(jìn)行質(zhì)量控制(QC)，確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。檢測(cè)報(bào)告必須清晰標(biāo)明所依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)方法及其檢出限(LOD)和定量限(LOQ)。

適用領(lǐng)域： 食品檢測(cè)機(jī)構(gòu)、第三方檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室、畜牧水產(chǎn)養(yǎng)殖企業(yè)、獸藥生產(chǎn)企業(yè)、飼料生產(chǎn)企業(yè)、食品藥品監(jiān)督管理部門、出入境檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)、大學(xué)及科研院所等。