小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢測
小腸結(jié)腸炎耶爾森菌（Yersinia enterocolitica）是一種重要的人畜共患病原菌，主要引|起人類腸道感染（如腸炎、闌尾炎樣癥狀）及全身性并發(fā)癥（如反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎）。該菌廣泛存在于自然界，尤其在豬、牛等動物及污染的食品（如生豬肉、乳制品、蔬菜）中常見。由于其低溫生長特性（4°C仍可繁殖），冷藏食品可能成為傳播媒介。因此，建立快速、準(zhǔn)確的檢測體系對食品安全監(jiān)控、臨床診斷及流行病學(xué)調(diào)查至關(guān)重要。檢測需覆蓋食品、環(huán)境樣本（水、土壤）、動物糞便及患者臨床標(biāo)本（糞便、血液），通過多維度分析確保結(jié)果可靠性。
檢測項(xiàng)目
針對小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的檢測主要包括以下核心項(xiàng)目：
1. 病原菌分離培養(yǎng)：通過選擇性培養(yǎng)基分離疑似菌落，為后續(xù)鑒定提供基礎(chǔ)。
2. 生化鑒定：利用生化反應(yīng)（如尿素酶試驗(yàn)、鳥氨酸脫羧酶試驗(yàn)）確認(rèn)菌種特性。
3. 血清學(xué)分型：檢測菌體抗原（如O:3, O:9等致病血清型），確定流行株型別。
4. 毒力基因檢測：PCR法檢測ail（侵襲素基因）、yst（耐熱腸毒素基因）、yadA（黏附因子基因）等關(guān)鍵毒力因子。
5. 抗生素敏感性試驗(yàn)：評估臨床分離株對常用抗生素（如慶大霉素、環(huán)丙沙星）的耐藥性。
檢測儀器
檢測過程中需依賴多種精密儀器以保障準(zhǔn)確性與效率：
微生物培養(yǎng)系統(tǒng)：恒溫培養(yǎng)箱（支持4°C冷增菌）、厭氧培養(yǎng)箱。
自動化鑒定儀：VITEK 2 Compact、BD Phoenix? 等系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)快速生化鑒定。
分子生物學(xué)設(shè)備：PCR儀、實(shí)時熒光定量PCR儀（qPCR）、凝膠電泳系統(tǒng)及核酸提取儀。
血清學(xué)檢測設(shè)備：酶標(biāo)儀（ELISA法）、凝集反應(yīng)觀察裝置。
藥敏分析系統(tǒng)：Kirby-Bauer紙片擴(kuò)散法配套儀器或自動化藥敏測試儀。
檢測方法
依據(jù)樣本類型及檢測目標(biāo)，主要采用以下方法組合：
1. 培養(yǎng)法：
- 冷增菌：樣本于4°C PBS緩沖液中培養(yǎng)21天，增強(qiáng)低濃度菌檢出率。
- 選擇性培養(yǎng)：使用CIN瓊脂（頭孢磺啶-新生霉素-鉍酸鹽培養(yǎng)基）或科瑪嘉耶爾森菌選擇性平板，25-30°C培養(yǎng)24-48小時，典型菌落呈"牛眼狀"（紅色中心+透明邊）。
2. 生化鑒定法：通過API 20E或微量生化管系統(tǒng)驗(yàn)證尿素酶陽性、氧化酶陰性、蔗糖發(fā)酵等特征。
3. 分子檢測法：
- 常規(guī)PCR：擴(kuò)增ail、ystA等基因，凝膠電泳判讀結(jié)果。
- 實(shí)時熒光PCR：采用TaqMan探針法直接檢測樣本中的目標(biāo)基因，靈敏度高且可定量。
4. 免疫學(xué)方法：ELISA檢測患者血清中特異性抗體，或乳膠凝集試驗(yàn)快速鑒定O抗原。
檢測標(biāo)準(zhǔn)
國際及國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)確保檢測流程規(guī)范化，主要依據(jù)：
ISO 10273:2017：
《食物鏈微生物學(xué)—小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢測與計(jì)數(shù)參考方法》，規(guī)定食品樣本的冷增菌、CIN平板分離及生化確認(rèn)流程。
FDA BAM Chapter 8：
美國食品藥品監(jiān)督管理局《細(xì)菌學(xué)分析手冊》第8章，詳述增菌液（ITC培養(yǎng)基）及PCR確證方法。
GB 4789.8-2016：
中國國家標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢驗(yàn)》，等效采用ISO方法并補(bǔ)充血清分型步驟。
CLSI M45-A3：
臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會指南，規(guī)范臨床分離株的藥敏試驗(yàn)方法與判讀標(biāo)準(zhǔn)。
以上標(biāo)準(zhǔn)均強(qiáng)調(diào)：在病原鑒定中需結(jié)合表型與基因型特征（如毒力基因），區(qū)分致病株與非致病株，避免假陽性結(jié)果。
CMA認(rèn)證
檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書
證書編號：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS認(rèn)可
實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書
證書編號：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO認(rèn)證
質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書
證書編號：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
掃一掃，更多精彩
