您現(xiàn)在的位置：首頁(yè) > 檢測(cè)項(xiàng)目 > 其他檢測(cè)

土霉素、四環(huán)素、金霉素（總量）檢測(cè)

1對(duì)1客服專屬服務(wù)，免費(fèi)制定檢測(cè)方案，15分鐘極速響應(yīng)

可選形式：電子報(bào)告紙質(zhì)報(bào)告

可選語(yǔ)言：中文報(bào)告英文報(bào)告

發(fā)布時(shí)間：2025-07-21 07:30:53 更新時(shí)間：2025-07-20 07:30:53

點(diǎn)擊：0

作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

土霉素、四環(huán)素、金霉素（總量）檢測(cè)概述

土霉素（Oxytetracycline）、四環(huán)素（Tetracycline）和金霉素（Chlortetracycline）是廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖和水產(chǎn)養(yǎng)殖中的廣譜抗生素，用于預(yù)防和治療細(xì)菌性疾病。然而，其不合理使用可能導(dǎo)致藥物在動(dòng)物源性食品（如肉類、蛋類、奶類、蜂蜜、水產(chǎn)品）及環(huán)境中殘留，通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體，引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)、腸道菌群失調(diào)、細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)等健康風(fēng)險(xiǎn)，甚至影響生態(tài)環(huán)境。因此，建立高效、準(zhǔn)確、靈敏的檢測(cè)方法，對(duì)食品、飼料、環(huán)境樣品中土霉素、四環(huán)素、金霉素的總量進(jìn)行監(jiān)控，是保障食品安全、保護(hù)消費(fèi)者健康、規(guī)范養(yǎng)殖業(yè)用藥的重要技術(shù)支撐。

檢測(cè)項(xiàng)目

本檢測(cè)項(xiàng)目的核心目標(biāo)是定量測(cè)定樣品中土霉素（OTC）、四環(huán)素（TC）和金霉素（CTC）三種四環(huán)素類抗生素的殘留總量。根據(jù)實(shí)際監(jiān)管和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需求，檢測(cè)項(xiàng)目通常包括：

1. 定性分析： 確認(rèn)樣品中是否存在土霉素、四環(huán)素、金霉素或其代謝物。
2. 定量分析： 精確測(cè)定土霉素、四環(huán)素、金霉素各自的具體殘留量（通常以μg/kg或μg/L表示）。
3. 總量檢測(cè)： 計(jì)算并報(bào)告土霉素、四環(huán)素、金霉素三者殘留量的總和（∑OTC+TC+CTC），作為總體殘留水平評(píng)估的依據(jù)。部分法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)直接對(duì)四環(huán)素類藥物殘留總量設(shè)定限量。

主要檢測(cè)儀器

準(zhǔn)確測(cè)定土霉素、四環(huán)素、金霉素總量需要依賴精密的實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備，主要包括：

1. 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀 (LC-MS/MS)： 是目前最主流、最權(quán)威的檢測(cè)設(shè)備。液相色譜（LC）高效分離三種化合物及其可能的異構(gòu)體或降解產(chǎn)物，串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）通過(guò)多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）實(shí)現(xiàn)高選擇性和高靈敏度（可達(dá)ppb甚至ppt級(jí)）的定性與定量分析。
2. 高效液相色譜儀配紫外/熒光檢測(cè)器 (HPLC-UV/FLD)： 成本相對(duì)較低，操作較簡(jiǎn)便。利用四環(huán)素類化合物在特定波長(zhǎng)下的紫外吸收（通常在270nm或360nm附近）或衍生化后的熒光特性進(jìn)行檢測(cè)。但其選擇性和靈敏度通常低于LC-MS/MS，易受基質(zhì)干擾，適用于濃度較高或基質(zhì)相對(duì)簡(jiǎn)單的樣品。
3. 固相萃取裝置 (SPE)： 用于樣品的凈化和富集。常用C18、HLB（親水親脂平衡）等類型的SPE小柱去除樣品基質(zhì)中的脂肪、蛋白質(zhì)、色素等干擾物質(zhì)，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度和靈敏度。
4. 高速離心機(jī)： 用于樣品的初步分離和沉淀。
5. 氮吹儀/旋蒸儀： 用于濃縮提取液。
6. pH計(jì)： 用于調(diào)節(jié)提取液pH值，優(yōu)化提取效率（四環(huán)素類在特定pH下穩(wěn)定性較好）。
7. 分析天平： 精確稱量樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。

檢測(cè)方法

檢測(cè)過(guò)程通常包括樣品前處理和儀器分析兩大步驟：

一、樣品前處理：
1. 提取： 將代表性樣品（如均質(zhì)后的肉類、研磨后的飼料、過(guò)濾后的水樣等）用合適的提取溶劑（常用McIlvaine緩沖液、EDTA-Mcllvaine緩沖液、酸化乙腈、酸化甲醇等）進(jìn)行振蕩或均質(zhì)提取。緩沖液中的螯合劑（如EDTA）能有效絡(luò)合樣品中的金屬離子，減少其與四環(huán)素類藥物的結(jié)合，提高提取效率。
2. 凈化： 粗提液通常含有大量干擾物質(zhì)。通過(guò)高速離心去除沉淀后，上清液經(jīng)固相萃取（SPE）柱進(jìn)行凈化富集。選擇合適的淋洗液和洗脫液，使目標(biāo)化合物被保留并洗脫下來(lái)，而干擾物被去除。
3. 濃縮與復(fù)溶： 洗脫液經(jīng)氮?dú)獯蹈苫驕睾托D(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后，用初始流動(dòng)相或特定溶劑復(fù)溶，定容，準(zhǔn)備上機(jī)分析。
4. 過(guò)濾： 上機(jī)前樣品溶液需經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾，去除顆粒物。

二、儀器分析：
1. LC分離： 使用反相色譜柱（如C18柱），以甲醇/乙腈-水（通常含甲酸/乙酸或緩沖鹽）為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，實(shí)現(xiàn)土霉素、四環(huán)素、金霉素的良好分離。
2. MS/MS檢測(cè) (針對(duì)LC-MS/MS)： 采用電噴霧離子源（ESI），在正離子模式下使目標(biāo)化合物電離成[M+H]+母離子。設(shè)定特定的母離子-子離子對(duì)（MRM通道），監(jiān)測(cè)其特異性碎片離子，實(shí)現(xiàn)高選擇性的定性和定量。
3. UV/FLD檢測(cè) (針對(duì)HPLC-UV/FLD)： 在特定波長(zhǎng)下（如UV在355nm或365nm，F(xiàn)LD需衍生化后檢測(cè)）測(cè)定色譜峰的吸光度或熒光強(qiáng)度，與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比進(jìn)行定量。
4. 定量方法： 主要采用外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法（常用氘代同位素內(nèi)標(biāo)，如d6-土霉素等）。根據(jù)各目標(biāo)物的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其濃度，最后加和計(jì)算總量。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

土霉素、四環(huán)素、金霉素（總量）的檢測(cè)需遵循權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)方法，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性、可比性和法律效力。國(guó)內(nèi)外主要標(biāo)準(zhǔn)包括：

1. 中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) (GB):
* GB 31658.6-2021 《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 動(dòng)物性食品中四環(huán)素類藥物殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》：規(guī)定了動(dòng)物肌肉、內(nèi)臟、水產(chǎn)品、牛奶、雞蛋等中多種四環(huán)素類藥物（包括OTC、TC、CTC）殘留量的LC-MS/MS檢測(cè)方法，是目前國(guó)內(nèi)最常用的強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)。
* GB/T 21317-2007 《動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測(cè)方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法與高效液相色譜法》：雖然較老，但仍被部分引用，包含LC-MS/MS和HPLC兩種方法。
* GB 13078-2017 《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》：規(guī)定了飼料中金霉素、土霉素等藥物的限量要求（以單個(gè)或總量計(jì)），其檢測(cè)方法通常參照上述食品標(biāo)準(zhǔn)或農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
2. 農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) (NY):
* NY/T 1033-2006 《飼料中革蘭氏陽(yáng)性菌的測(cè)定微生物學(xué)方法》：雖然主要測(cè)微生物，但有附錄規(guī)定了飼料中金霉素、土霉素的HPLC檢測(cè)方法（參考方法）。更常用的是參照GB標(biāo)準(zhǔn)或更新的方法。
3. 出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) (SN):
* 如SN/T 000X系列（具體編號(hào)需查最新）常包含出口動(dòng)物源性食品中四環(huán)素類藥物的檢測(cè)方法（通常與國(guó)標(biāo)類似或采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)）。
4. 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：
* 歐盟指令 (EU)： 如Commission Decision 2002/657/EC關(guān)于分析方法性能準(zhǔn)則，以及后續(xù)修訂指令中規(guī)定的LC-MS/MS方法。歐盟對(duì)不同動(dòng)物組織中的四環(huán)素類總量（OTC+TC+CTC）有明確限量（MRL）。
* 美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局 (FDA)： 有相關(guān)的分析方法手冊(cè)（如Chemistry Laboratory Guidebook），包含HPLC和LC-MS/MS方法。
* 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織 (ISO)： 如ISO 13969:2009 Milk and milk products - Guidelines for a standardized description of microbial inhibitor tests（涉及抗生素檢測(cè)）。更具體的四環(huán)素類檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)可參考各國(guó)藥典或AOAC方法。

限量要求： 不同國(guó)家和組織對(duì)動(dòng)物源性食品中土霉素、四環(huán)素、金霉素的殘留限量（MRL）規(guī)定不同，有時(shí)對(duì)單個(gè)藥物設(shè)限（如肌肉中土霉素100 μg/kg），有時(shí)對(duì)四環(huán)素類總量（∑OTC+TC+CTC）設(shè)限（如歐盟規(guī)定牛奶