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雙岐桿菌檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-19 14:10:12 更新時(shí)間：2025-07-18 14:10:12

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

雙岐桿菌檢測(cè)

雙岐桿菌（Bifidobacterium）是一類重要的益生菌，廣泛分布于人體腸道、口腔和母乳中，對(duì)維持腸道微生態(tài)平衡、增強(qiáng)免疫系統(tǒng)功能、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)吸收及預(yù)防過敏性疾病具有顯著作用。隨著益生菌產(chǎn)品在食品、保健品、藥品和嬰幼兒配方奶粉中的廣泛應(yīng)用，雙岐桿菌檢測(cè)已成為質(zhì)量控制、安全評(píng)估和臨床診斷的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。檢測(cè)不僅確保產(chǎn)品中活菌數(shù)量達(dá)標(biāo)，還能驗(yàn)證菌株的純度和功能性，避免污染或虛假宣傳，保障消費(fèi)者健康。在全球范圍內(nèi)，雙岐桿菌相關(guān)產(chǎn)品市場(chǎng)規(guī)模持續(xù)增長(zhǎng)，檢測(cè)技術(shù)不斷創(chuàng)新，從傳統(tǒng)培養(yǎng)方法向快速分子技術(shù)演進(jìn)。本文從檢測(cè)項(xiàng)目、檢測(cè)儀器、檢測(cè)方法及檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)四個(gè)方面，全面闡述雙岐桿菌檢測(cè)的科學(xué)過程和實(shí)踐應(yīng)用。

檢測(cè)項(xiàng)目

雙岐桿菌檢測(cè)涵蓋多個(gè)核心項(xiàng)目，確保全面評(píng)估菌株質(zhì)量和活性。首要項(xiàng)目是菌株鑒定，通過形態(tài)學(xué)或分子生物學(xué)方法確認(rèn)檢測(cè)對(duì)象是否為雙岐桿菌屬的目標(biāo)種（如Bifidobacterium bifidum或Bifidobacterium longum），排除其他雜菌干擾。其次是活菌計(jì)數(shù)，采用定量分析確定樣品中活性雙岐桿菌的數(shù)量，常用單位為菌落形成單位（CFU/g或CFU/mL），這對(duì)益生菌產(chǎn)品的效能評(píng)估至關(guān)重要。此外，定性檢測(cè)用于判斷樣品中是否存在雙岐桿菌，尤其適用于低濃度樣品的篩查；純度檢測(cè)則評(píng)估菌株是否被其他微生物污染；功能性測(cè)試可能包括耐受性、產(chǎn)酸能力或抗性檢測(cè)，以驗(yàn)證菌株在腸道環(huán)境中的生存能力和益生效果。這些項(xiàng)目共同構(gòu)成了雙岐桿菌檢測(cè)的完整框架，支持產(chǎn)品研發(fā)和質(zhì)量控制。

檢測(cè)儀器

在雙岐桿菌檢測(cè)中，依賴多種專業(yè)儀器提升檢測(cè)精度和效率。核心儀器包括顯微鏡（如光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡），用于初步觀察細(xì)菌形態(tài)和染色特性；恒溫培養(yǎng)箱（厭氧或微需氧型），提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境（通常37°C）用于培養(yǎng)；全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)器，高效統(tǒng)計(jì)瓊脂平板上的菌落數(shù)量，減少人為誤差。分子檢測(cè)階段需使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）儀或?qū)崟r(shí)熒光定量PCR（qPCR）儀，用于擴(kuò)增和定量雙岐桿菌特異性基因片段（如16S rRNA基因）。此外，分光光度計(jì)用于測(cè)量細(xì)菌培養(yǎng)液的吸光度以估算細(xì)胞密度；流式細(xì)胞儀可快速分析細(xì)胞活力；酶標(biāo)儀則適用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。這些儀器協(xié)同工作，確保檢測(cè)過程標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化，并能處理大批量樣品。

檢測(cè)方法

雙岐桿菌檢測(cè)方法多樣，主要分為傳統(tǒng)培養(yǎng)法和現(xiàn)代分子生物學(xué)方法兩類。傳統(tǒng)培養(yǎng)法基于選擇性培養(yǎng)基（如MRS瓊脂或BL瓊脂），在厭氧條件下接種樣品，培養(yǎng)24-72小時(shí)后計(jì)數(shù)菌落形成單位（CFU），適用于活菌定量，但耗時(shí)較長(zhǎng)且可能遺漏非培養(yǎng)菌株。分子生物學(xué)方法包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR），通過特異性引物擴(kuò)增雙岐桿菌的16S rRNA基因進(jìn)行定性和定量，靈敏度高、速度快（約2-4小時(shí)），尤其在低豐度樣品中優(yōu)勢(shì)明顯。其他方法如基因芯片或宏基因組測(cè)序用于高通量鑒定；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合熒光染料可快速評(píng)估細(xì)胞活性；免疫學(xué)方法如ELISA則基于抗體-抗原反應(yīng)檢測(cè)特異性蛋白。這些方法的選擇需結(jié)合樣品類型、檢測(cè)目的和資源條件，確保結(jié)果可靠。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

雙岐桿菌檢測(cè)需嚴(yán)格遵循國(guó)際和國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)，以保證結(jié)果的可比性和公信力。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)如ISO 19344:2015詳細(xì)規(guī)定了乳制品中益生菌（包括雙岐桿菌）的定量方法，涵蓋培養(yǎng)基制備、培養(yǎng)條件（如37°C厭氧培養(yǎng)）、計(jì)數(shù)規(guī)程及結(jié)果報(bào)告要求。中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.35-2016針對(duì)食品微生物檢測(cè)，提供雙岐桿菌的活菌計(jì)數(shù)和鑒定指南，強(qiáng)調(diào)樣品前處理（如均質(zhì)化和稀釋）和質(zhì)量控制措施。此外，藥典標(biāo)準(zhǔn)（如中國(guó)藥典或美國(guó)藥典）適用于藥品相關(guān)檢測(cè)；行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)如AOAC國(guó)際方法也廣泛應(yīng)用。這些標(biāo)準(zhǔn)均要求實(shí)驗(yàn)室實(shí)施內(nèi)部質(zhì)量控制（如陽性/陰性對(duì)照）、儀器校準(zhǔn)、人員培訓(xùn)和不確定度評(píng)估，確保檢測(cè)過程符合GLP（良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范）原則。

綜上所述，雙岐桿菌檢測(cè)是保障益生菌產(chǎn)品安全性和有效性的核心環(huán)節(jié)，通過系統(tǒng)化的項(xiàng)目設(shè)計(jì)、先進(jìn)的儀器支撐、科學(xué)的方法應(yīng)用和嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)化流程，實(shí)現(xiàn)高精度監(jiān)測(cè)。隨著技術(shù)進(jìn)步，如宏組學(xué)方法和微流控芯片的興起，檢測(cè)效率和準(zhǔn)確性將持續(xù)提升，為全球健康產(chǎn)業(yè)提供強(qiáng)大支持。