三甲氧芐氨嘧啶(TMP)檢測(cè)

三甲氧芐氨嘧啶（Trimethoprim, TMP）是一種廣譜抗菌劑，常與磺胺類藥物（如磺胺甲噁唑SMX）聯(lián)合使用，通過(guò)雙重阻斷細(xì)菌的葉酸合成途徑來(lái)增強(qiáng)抗菌效果（如復(fù)方新諾明）。TMP廣泛應(yīng)用于人類醫(yī)藥、獸醫(yī)領(lǐng)域及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。然而，TMP的不合理使用或?yàn)E用可能導(dǎo)致其在動(dòng)物源性食品（如肉類、乳制品、水產(chǎn)品）及環(huán)境水體中殘留，進(jìn)而可能通過(guò)食物鏈傳遞對(duì)人體健康構(gòu)成潛在威脅（如過(guò)敏反應(yīng)、腸道菌群失調(diào)、甚至促進(jìn)細(xì)菌耐藥性發(fā)展）。因此，建立靈敏、準(zhǔn)確、高效的TMP檢測(cè)方法，對(duì)保障食品安全、評(píng)估環(huán)境污染程度、監(jiān)控藥物合理使用以及滿足國(guó)內(nèi)外法規(guī)要求至關(guān)重要。

檢測(cè)項(xiàng)目

TMP檢測(cè)的核心項(xiàng)目通常包括：

• 殘留量檢測(cè)： 主要針對(duì)動(dòng)物源性食品（肌肉、肝臟、腎臟、脂肪、乳、蛋、蜂蜜等）、水產(chǎn)品、飼料、環(huán)境樣品（水、土壤）以及藥品制劑中TMP及其主要代謝物的含量。
• 純度與含量測(cè)定： 在TMP原料藥及制劑生產(chǎn)過(guò)程中，對(duì)其主成分含量、有關(guān)物質(zhì)（雜質(zhì)）進(jìn)行控制。
• 非法添加篩查： 在非預(yù)期含有TMP的產(chǎn)品（如某些宣稱無(wú)抗的食品或保健品）中進(jìn)行篩查。

檢測(cè)儀器

TMP檢測(cè)主要依賴精密的分析儀器，常用的包括：

• 高效液相色譜儀（HPLC）： 最常用的檢測(cè)設(shè)備，尤其配備紫外檢測(cè)器（UV）或二極管陣列檢測(cè)器（DAD）。適用于含量測(cè)定、有關(guān)物質(zhì)檢查及殘留量檢測(cè)（需滿足靈敏度要求）。
• 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS/MS）： 目前殘留檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。具有極高的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性，能同時(shí)檢測(cè)TMP及其多種代謝物和同類藥物，尤其適用于復(fù)雜基質(zhì)（如動(dòng)物組織、飼料、環(huán)境樣品）中痕量殘留的定性和定量分析。
• 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（UV-Vis）： 可用于TMP原料藥或簡(jiǎn)單制劑中主成分的快速含量測(cè)定，但特異性相對(duì)較低。
• 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）試劑盒： 基于抗原抗體反應(yīng)，適合大批量樣品的快速初篩，具有操作簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)，但需注意可能存在假陽(yáng)性/假陰性，定量精度通常不如色譜法。

檢測(cè)方法

TMP檢測(cè)通常包含以下關(guān)鍵步驟：

1. 樣品前處理： 這是關(guān)鍵步驟，直接影響結(jié)果的準(zhǔn)確性和靈敏度。
   • 提?。?/strong> 使用合適的溶劑（如乙腈、甲醇、酸化/堿化有機(jī)溶劑混合液、緩沖鹽溶液）將TMP從樣品基質(zhì)（如組織勻漿、液體樣品、粉碎的飼料/藥品）中溶解出來(lái)。
   • 凈化： 去除提取液中的脂肪、蛋白質(zhì)、色素等干擾物質(zhì)。常用方法包括液液萃取（LLE）、固相萃?。⊿PE，常用C18、HLB、MCX等填料）、QuEChERS法等。對(duì)于LC-MS/MS分析，凈化要求尤其高。
   • 濃縮與復(fù)溶： 將凈化后的提取液濃縮至較小體積（如氮吹），并用適合儀器分析的溶劑（如初始流動(dòng)相）復(fù)溶或定容。
2. 儀器分析：
   • HPLC-UV/DAD： 優(yōu)化色譜條件（色譜柱：常選用C18柱；流動(dòng)相：甲醇/乙腈-緩沖鹽溶液；流速；柱溫；檢測(cè)波長(zhǎng)：~230nm或~270nm附近）進(jìn)行分離和定量。
   • LC-MS/MS： 在優(yōu)化液相分離條件的基礎(chǔ)上，選擇合適的離子源（ESI+），優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)（母離子、子離子、碰撞能量等），采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）進(jìn)行高靈敏度、高選擇性的檢測(cè)。
   • ELISA： 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，進(jìn)行加樣、孵育、洗滌、顯色、終止反應(yīng)和測(cè)定吸光度值。
3. 定量分析： 使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法或內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。LC-MS/MS常用同位素內(nèi)標(biāo)（如TMP-D₉）以提高定量的準(zhǔn)確性。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

TMP的檢測(cè)需遵循國(guó)內(nèi)外相關(guān)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)方法，確保結(jié)果的可靠性和可比性。主要標(biāo)準(zhǔn)包括：

• 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（中國(guó)GB）：
  • GB 31658.17-2021 《動(dòng)物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和氯霉素類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》：明確規(guī)定了動(dòng)物性食品（肌肉、肝臟、腎臟、脂肪、魚(yú)蝦、牛奶、雞蛋）中TMP殘留檢測(cè)的LC-MS/MS方法（包括前處理、儀器參數(shù)、定量限、判定限等）。
  • GB/T 21316-2007 《動(dòng)物源性食品中磺胺類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》：雖主要針對(duì)磺胺，但部分方法也適用于TMP或其復(fù)方制劑殘留的檢測(cè)。
  • GB/T 20764-2006 《可食動(dòng)物肌肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素、強(qiáng)力霉素和磺胺類藥物殘留量的測(cè)定 液相色譜-紫外檢測(cè)法》：可用于肌肉中TMP的HPLC-UV檢測(cè)（靈敏度可能低于LC-MS/MS）。
• 中國(guó)藥典（ChP）： 對(duì)TMP原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了性狀、鑒別、檢查（如有關(guān)物質(zhì)、干燥失重、灼熾殘?jiān)⒑繙y(cè)定（HPLC法）等項(xiàng)目和方法。
• 國(guó)際/國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)：
  • 歐盟指令（EU）及歐盟參考實(shí)驗(yàn)室（EURL）方法：對(duì)動(dòng)物源性食品中TMP等藥物殘留有嚴(yán)格的最高殘留限量（MRL）要求和推薦檢測(cè)方法（主要基于LC-MS/MS）。
  • 美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）方法：發(fā)布有用于食品和飼料中獸藥殘留檢測(cè)的官方方法（如LC-MS/MS方法）。
  • 日本肯定列表制度：規(guī)定了食品中TMP的限量要求和檢測(cè)方法。
  • 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（ISO）、國(guó)際獸藥法典委員會(huì)（CCRVDF）等也有相關(guān)指導(dǎo)文件。

具體檢測(cè)應(yīng)優(yōu)先采用現(xiàn)行有效的國(guó)家強(qiáng)制標(biāo)準(zhǔn)或推薦標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)室在開(kāi)發(fā)或采用非標(biāo)準(zhǔn)方法時(shí)，需進(jìn)行充分的方法學(xué)驗(yàn)證，確保其滿足檢測(cè)要求。

檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)證書(shū)

CMA認(rèn)證

檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書(shū)

證書(shū)編號(hào)：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS認(rèn)可

實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書(shū)

證書(shū)編號(hào)：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO認(rèn)證

質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書(shū)

證書(shū)編號(hào)：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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