副結核檢疫檢測概述
副結核（Paratuberculosis）是由禽分枝桿菌副結核亞種（Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis, MAP）引起的一種慢性消耗性傳染病，主要感染牛、羊等反芻動物，表現為漸進性消瘦、腹瀉和腸黏膜增厚等特征。該病具有潛伏期長、傳播途徑復雜的特點，可通過糞便、乳汁及垂直傳播擴散，對畜牧業(yè)經濟造成重大損失。近年來，副結核的人畜共患潛力也備受關注，因此精準的檢疫檢測技術對動物健康管理、食品安全保障及公共衛(wèi)生安全具有重要意義。
檢測項目
副結核檢疫檢測主要包括以下核心項目：
1. 病原學檢測：通過細菌培養(yǎng)或分子生物學方法直接檢測樣本中的MAP；
2. 血清學檢測：利用ELISA、補體結合試驗等檢測動物體內特異性抗體；
3. 病理學檢測：通過組織切片觀察肉芽腫病變及抗酸染色確認病原體；
4. 核酸檢測：基于IS900、F57等MAP特異性基因序列的PCR或實時熒光定量PCR檢測。
檢測儀器與設備
副結核檢測需依賴專業(yè)儀器以提高靈敏度和準確性：
- 分子生物學設備：PCR儀、實時熒光定量PCR儀、核酸提取儀；
- 血清學設備：酶標儀、洗板機、離心機；
- 微生物培養(yǎng)設備：CO?培養(yǎng)箱、生物安全柜、顯微鏡（用于抗酸染色觀察）；
- 病理學設備：組織切片機、顯微成像系統(tǒng)。
檢測方法及流程
1. 細菌培養(yǎng)法：
采集糞便或腸道組織樣本，使用含分枝桿菌素的選擇性培養(yǎng)基（如HEYM培養(yǎng)基），在37℃下培養(yǎng)8-12周，通過菌落形態(tài)和抗酸染色確認MAP存在。該方法為“金標準”，但耗時較長。
2. PCR檢測法：
提取樣本DNA后，采用針對IS900基因的特異性引物進行擴增，通過電泳或熒光信號判斷結果，可在24小時內完成檢測，靈敏度高達10^3 CFU/g。
3. ELISA檢測：
使用MAP特異性抗原（如PPA或P22）包被微孔板，加入待檢血清后，通過酶標二抗顯色定量分析抗體水平，適合大規(guī)模篩查。
4. 病理組織學檢查：
對腸系膜淋巴結或回腸末端進行石蠟切片，采用HE染色觀察肉芽腫結構，Ziehl-Neelsen染色確認抗酸桿菌。
檢測標準與規(guī)范
副結核檢測需遵循國際和國內標準：
- 國際標準：OIE《陸生動物診斷試驗和疫苗手冊》規(guī)定的培養(yǎng)與PCR方法；
- 中國國家標準：GB/T 18648-2020《副結核病診斷技術》明確規(guī)定了病原分離、PCR及ELISA的操作規(guī)范；
- 行業(yè)規(guī)范：NY/T 907-2004《牛副結核病檢疫技術規(guī)范》詳細規(guī)定了臨床采樣與實驗室檢測流程。
檢測結果需結合流行病學資料綜合判定，陽性樣本需進行復核并上報動物疫病防控系統(tǒng)。
CMA認證
檢驗檢測機構資質認定證書
證書編號：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS認可
實驗室認可證書
證書編號：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO認證
質量管理體系認證證書
證書編號：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
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