APP基因位于染色體21q11.2-22.2上，由18個外顯子和17個內(nèi)含子組成?；虍a(chǎn)物為跨膜糖蛋白，由APP基因通過選擇性剪切翻譯而成。APP至少有六種剪接形式，長度分別為365、563、695、714、751、770個氨基酸殘基，其中695、751和770為主要形式。APP695主要在大腦表達，尤其在AD病人的海馬回和皮層中APP695與APP751的比率異常，且與腦中這些部位斑塊的數(shù)量呈正相關。由APP編碼的APP蛋白經(jīng)過加工水解可產(chǎn)生β淀粉樣蛋白（β amyloid， Aβ）。病理情況下，APP經(jīng)過β分泌酶和γ分泌酶分解生成Aβ40和Aβ42，其中Aβ42與AD患者腦中Aβ沉積和神經(jīng)元的變性密切相關。在家族性AD患者中已鑒定出多個APP基因的突變位點。其中大部分突變位于外顯子16和17的分泌酶裂解位點或APP跨膜區(qū)，如APP瑞典突變（APPswe：APP K670N和M671L）和倫敦突變（APPlon：APPV717I）。APP突變可改變APP的加工過程，導致具有神經(jīng)毒性作用的Aβ42產(chǎn)生，引發(fā)多種病理機制，促使神經(jīng)細胞凋亡或死亡，最終導致AD的發(fā)生。

PS1基因位于14號染色體，共10個外顯子。PS1基因編碼的PS蛋白為γ分泌酶的重要組成部分，在生成Aβ的過程中起重要作用。PS1突變是引起家族性AD的主要原因之一。PS1突變使其編碼的蛋白親水性環(huán)狀結(jié)構域缺失，導致其構象改變，可影響γ-分泌酶的活性，使Aβ42生成增多。

1、模型制作

APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠模型是利用PrP-hAPPK595N/M596L單轉(zhuǎn)基因癡呆模型小鼠和PrP-hPS1dE9單轉(zhuǎn)基因癡呆癥模型小鼠雜交培育而成。

2、基因型鑒定

提取首建鼠后代鼠尾DNA，PCR擴增，1%瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果如圖1。

圖1. PCR鑒定APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠的凝膠電泳分析結(jié)果。

M：marker；N：陰性對照；P：陽性對照；1,2,3,4,5號為APP/PS1轉(zhuǎn)基因陽性小鼠