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LPS（脂多糖）檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間：2025-07-24 22:11:20

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

LPS（脂多糖）檢測(cè)技術(shù)

檢測(cè)的重要性和背景介紹

脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外膜的主要成分，由脂質(zhì)A、核心多糖和O-抗原三部分組成，是內(nèi)毒素的主要活性成分。LPS檢測(cè)在醫(yī)療診斷、藥品安全、食品衛(wèi)生和環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域具有重要意義。在臨床上，LPS水平可作為感染診斷和預(yù)后評(píng)估的重要指標(biāo)；在制藥行業(yè)，LPS檢測(cè)是注射劑質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)；在食品工業(yè)中，LPS檢測(cè)有助于評(píng)估食品微生物污染情況；在環(huán)境監(jiān)測(cè)方面，LPS可作為水體細(xì)菌污染的生物標(biāo)志物。隨著醫(yī)療質(zhì)量要求的提高和生物制品產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，LPS檢測(cè)技術(shù)正變得越來(lái)越重要。

具體的檢測(cè)項(xiàng)目和范圍

LPS檢測(cè)主要包括以下項(xiàng)目：1) LPS含量定量檢測(cè)；2) LPS活性測(cè)定；3) LPS來(lái)源分析。檢測(cè)范圍涵蓋：1) 臨床樣本（血液、尿液、腦脊液等）；2) 藥品及生物制品（注射用水、疫苗、血液制品等）；3) 醫(yī)療器械（植入物、透析液等）；4) 食品和飲料；5) 環(huán)境樣本（水、空氣等）。根據(jù)不同的應(yīng)用場(chǎng)景，檢測(cè)的靈敏度和特異性要求有所不同。

使用的檢測(cè)儀器和設(shè)備

常用的LPS檢測(cè)設(shè)備包括：1) 鱟試劑(LAL)檢測(cè)系統(tǒng)（包括分光光度計(jì)、濁度儀或顯色儀）；2) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)系統(tǒng)；3) 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)系統(tǒng)；4) 流式細(xì)胞儀；5) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)儀。其中，基于鱟試劑的檢測(cè)方法因其高靈敏度和特異性而成為行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法。實(shí)驗(yàn)室還需配備生物安全柜、恒溫水浴鍋、微量移液器等輔助設(shè)備。

標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法和流程

常用的LPS檢測(cè)方法包括：1) 凝膠法：基于LPS與鱟試劑反應(yīng)形成凝膠的原理，操作簡(jiǎn)單但靈敏度較低；2) 濁度法：通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液濁度變化來(lái)定量LPS，靈敏度較高；3) 顯色法：利用顯色底物反應(yīng)后測(cè)定吸光度，靈敏度和精確度最佳；4) ELISA法：基于抗原抗體反應(yīng)，特異性強(qiáng)；5) 重組因子C法：新興的無(wú)動(dòng)物源性方法。標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)流程包括：樣本前處理（如去干擾、稀釋等）、標(biāo)準(zhǔn)曲線制備、反應(yīng)體系建立、結(jié)果測(cè)定和數(shù)據(jù)分析。整個(gè)過(guò)程需嚴(yán)格控制溫度、pH值和反應(yīng)時(shí)間等參數(shù)。

檢測(cè)結(jié)果的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

LPS檢測(cè)結(jié)果的評(píng)判需根據(jù)應(yīng)用領(lǐng)域采用不同標(biāo)準(zhǔn)：1) 藥品方面，注射用水的內(nèi)毒素限值為0.25EU/mL，非腸道用藥根據(jù)給藥途徑和劑量確定限值；2) 醫(yī)療器械方面，植入物通常要求<20EU/件；3) 臨床診斷方面，血漿LPS濃度>5pg/mL可能提示革蘭氏陰性菌感染。結(jié)果判定需考慮：1) 標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)性(r值應(yīng)≥0.980)；2) 回收率(應(yīng)在50%-200%之間)；3) 重復(fù)性(RSD應(yīng)<25%)；4) 樣品干擾驗(yàn)證。對(duì)于不合格結(jié)果，應(yīng)進(jìn)行復(fù)測(cè)和原因分析。