檢測(cè)背景
病毒保存液是一種病毒采樣管內(nèi)添加的專門用來(lái)保護(hù)鼻咽拭子采樣后樣本的保護(hù)型液體介質(zhì)。病毒保存液起到保存病毒樣本的作用，既保證了核酸病毒的完整性，又便于后期的檢測(cè)準(zhǔn)確性，病毒保存液檢測(cè)目的驗(yàn)證病毒滅活效果。
目前市面上有兩種病毒保存液，分別是滅活型病毒保存液和非滅活型病毒保存液。
滅活型病毒保存液是為了裂解和滅活病毒的，它可以保護(hù)檢測(cè)人員不受病毒的第二次感染傷害。滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解性保存液，里面添加有高濃度的裂解鹽，能夠迅速高效地使待測(cè)樣本里的病毒蛋白裂解失活，同時(shí)又含有RNA酶抑制劑，這樣既能保護(hù)病毒核酸不被降解，又能保證核酸的完整性而不影響后續(xù)的檢測(cè)結(jié)果。在常溫下也可以保存相對(duì)較長(zhǎng)的時(shí)間，節(jié)省了病毒樣本和運(yùn)輸?shù)某杀尽?/p>
非滅活型病毒保存液是為了保留病毒的蛋白質(zhì)外殼以及病毒核酸DNA或者是RNA，這樣就可以保證病毒樣本核酸在送檢過(guò)程中的完整性，雖然操作失誤時(shí)會(huì)也有一定的感染性風(fēng)險(xiǎn)，但是這種保存液最大程度地保持了病毒樣本的原始性，是一種培養(yǎng)型的病毒運(yùn)輸介質(zhì)，需要注意的是長(zhǎng)時(shí)間保存的需要在采樣后保持嚴(yán)格的低溫保存。
檢測(cè)條件
可開(kāi)展針對(duì)流感病毒、腸道病毒、冠狀病毒、皰疹病毒等病毒保存液病毒滅活效果檢測(cè)，病毒保存液檢測(cè)可針對(duì)不同保存溫度、不同保存時(shí)間等不同條件下的病毒活性及病毒滅活率。
檢測(cè)方法
1. 病毒保存液檢測(cè)對(duì)象
毒株：甲型流感病毒HINI (VR- 1469)
細(xì)胞：MDCK細(xì)胞
2.病毒保存液檢測(cè)步驟：
1)取樣品病毒保存液(非滅活型) 9.8mL，加入0.2mL病毒原液混勻，分裝若干測(cè)試液，存至要求溫度;
2)保存至對(duì)應(yīng)天數(shù)后取出測(cè)試液，檢測(cè)病毒滴度;
a)10倍倍比稀釋測(cè)試液;
b)將稀釋液加入含生長(zhǎng)至單層的MDCK細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，并設(shè)置正常對(duì)照組，加等量培養(yǎng)液;
c)置于35'C、5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育60 min后棄去上清液，加入雙抗400 IU/mL的維持培養(yǎng)液繼續(xù)孵育3~5天，每天觀察細(xì)胞增長(zhǎng)狀況;
d)當(dāng)接種病毒的MDCK細(xì)胞出現(xiàn)變圓或縮小等病變現(xiàn)象時(shí)，記錄產(chǎn)生細(xì)胞病變的情況;
e)根據(jù)Reed-Muench公式計(jì)算半數(shù)感染量TCID50。
報(bào)告模板
病毒保存液檢測(cè)報(bào)告模板主要包含試驗(yàn)毒株、實(shí)驗(yàn)批次、保存溫度、保存天數(shù)、病毒滴度、病毒活性及病毒滅活率等檢測(cè)數(shù)據(jù)，具體如下圖：
CMA認(rèn)證
檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書(shū)
證書(shū)編號(hào)：241520345370
有效期至：2030年4月15日
CNAS認(rèn)可
實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可證書(shū)
證書(shū)編號(hào)：CNAS L22006
有效期至：2030年12月1日
ISO認(rèn)證
質(zhì)量管理體系認(rèn)證證書(shū)
證書(shū)編號(hào)：ISO9001-2024001
有效期至：2027年12月31日
掃一掃，更多精彩