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動(dòng)物組織/血液/體液/拭子/糞便/細(xì)胞培養(yǎng)物犬瘟熱病毒核酸檢測(cè)

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發(fā)布時(shí)間：2025-09-15 18:33:17 更新時(shí)間：2025-09-15 23:53:33

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

動(dòng)物組織/血液/體液/拭子/糞便/細(xì)胞培養(yǎng)物犬瘟熱病毒核酸檢測(cè)

動(dòng)物組織/血液/體液/拭子/糞便/細(xì)胞培養(yǎng)物犬瘟熱病毒核酸檢測(cè)

犬瘟熱病毒（Canine Distemper Virus, CDV）是一種高度傳染性的病毒性疾病，主要影響犬科動(dòng)物，如狗、狐貍和狼等，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致高死亡率。為了有效控制和預(yù)防犬瘟熱的傳播，對(duì)動(dòng)物組織、血液、體液、拭子、糞便及細(xì)胞培養(yǎng)物中的犬瘟熱病毒進(jìn)行核酸檢測(cè)顯得至關(guān)重要。核酸檢測(cè)能夠快速、準(zhǔn)確地識(shí)別病毒的存在，即使在感染的早期階段或無癥狀攜帶者中也能提供可靠的診斷結(jié)果。這有助于獸醫(yī)及時(shí)采取隔離、治療和預(yù)防措施，從而減少疾病在動(dòng)物群體中的擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)。此外，核酸檢測(cè)在疫苗研發(fā)、流行病學(xué)調(diào)查和疫情監(jiān)測(cè)中也扮演著關(guān)鍵角色，確保動(dòng)物健康和公共衛(wèi)生安全。

檢測(cè)項(xiàng)目

本檢測(cè)項(xiàng)目專注于對(duì)多種生物樣本中的犬瘟熱病毒核酸進(jìn)行定性或定量分析。具體包括：動(dòng)物組織（如腦、肺、淋巴結(jié)等）、血液樣本（全血或血清）、體液（如唾液、淚液）、拭子樣本（鼻咽或眼結(jié)膜拭子）、糞便樣本以及細(xì)胞培養(yǎng)物（如病毒分離培養(yǎng)后的細(xì)胞）。檢測(cè)旨在確認(rèn)病毒RNA的存在，評(píng)估感染狀態(tài)，并可能用于監(jiān)測(cè)治療效果或疫苗免疫后的病毒載量變化。項(xiàng)目通常適用于臨床診斷、疫情爆發(fā)調(diào)查、科研實(shí)驗(yàn)以及進(jìn)出口檢疫等場(chǎng)景。

檢測(cè)儀器

進(jìn)行犬瘟熱病毒核酸檢測(cè)時(shí)，常用的儀器包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（qPCR）、常規(guī)PCR儀、核酸提取儀（如磁珠法或柱式提取系統(tǒng)）、電泳儀（用于PCR產(chǎn)物分析）、微量分光光度計(jì)（用于核酸濃度和純度檢測(cè)）以及生物安全柜（確保操作過程中的無菌環(huán)境）。這些儀器能夠高效處理樣本，從提取核酸到擴(kuò)增和檢測(cè)，提供高靈敏度和特異性的結(jié)果?，F(xiàn)代qPCR儀尤其重要，因?yàn)樗试S實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增過程，實(shí)現(xiàn)快速定量分析，縮短檢測(cè)時(shí)間，提高診斷效率。

檢測(cè)方法

檢測(cè)方法主要基于分子生物學(xué)技術(shù)，常用的是反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）或?qū)崟r(shí)熒光定量RT-PCR（qRT-PCR）。首先，從樣本中提取總RNA，使用商業(yè)試劑盒進(jìn)行純化。然后，通過反轉(zhuǎn)錄酶將RNA轉(zhuǎn)換為cDNA。接著，利用特異性引物和探針（針對(duì)犬瘟熱病毒的保守基因區(qū)域，如N或H基因）進(jìn)行PCR擴(kuò)增。在qRT-PCR中，熒光信號(hào)隨著擴(kuò)增進(jìn)程積累，通過閾值循環(huán)（Ct值）定量病毒RNA水平。方法還包括陰性對(duì)照和陽性對(duì)照以確保準(zhǔn)確性和避免污染。整個(gè)流程通常在2-4小時(shí)內(nèi)完成，提供高靈敏度的檢測(cè)，最低檢測(cè)限可達(dá)幾個(gè)病毒拷貝。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

檢測(cè)遵循國際和國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)以確保結(jié)果可靠和可比性。主要標(biāo)準(zhǔn)包括世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）的指南、中國國家標(biāo)準(zhǔn)（如GB/T 相關(guān) veterinary diagnostic methods）以及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制協(xié)議。標(biāo)準(zhǔn)涉及樣本采集、保存和運(yùn)輸（如使用無菌容器、低溫保存）、核酸提取程序、PCR反應(yīng)條件（如引物濃度、循環(huán)參數(shù)）、結(jié)果 interpretation（基于Ct值或電泳條帶），以及數(shù)據(jù)驗(yàn)證（通過重復(fù)實(shí)驗(yàn)或測(cè)序確認(rèn)）。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過認(rèn)證（如ISO/IEC 17025）并定期參與能力驗(yàn)證，以維持檢測(cè)的準(zhǔn)確性和一致性，減少假陽性或假陰性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)。