SHIVchn19p4靜脈途徑感染恒河猴模型
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發(fā)布時間:2025-07-25 08:49:03 更新時間:2025-07-25 08:14:02
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作者:中科光析科學技術研究所檢測中心
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資源中文名稱 | SHIVchn19p4靜脈途徑感染恒河猴模型 |
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資源英文名稱 | Rhesus Macaques intravenously infected with SHIVchn19p4 |
疾病概述 | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS),是由人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus, HIV)引起,以全身免疫系統(tǒng)嚴重損害為特征的傳染性疾病,是20世紀危害人類健康和生命最嚴重的病毒性疾病之一。自美國CDC報道首例艾滋病后,到20世紀80年代中期艾滋病發(fā)展成為一個全球性的流行病。截止2014年底,HIV已感染3690萬人,2014年新增感染者200萬,2014年因艾滋病死亡120萬人。艾滋病在1985年傳入我國,截至2015年5月31日,全國歷年累計報告艾滋病530628例,其中艾滋病病人217457例,死亡167159例。艾滋病早已成為全球關注的公共衛(wèi)生和社會熱點問題,艾滋病的預防與治療也成為當代生物醫(yī)學研究的前沿熱點之一。 |
實驗動物背景信息 | 恒河猴又名孟加拉猴、狝猴或廣西猴。學名為(Macaca mulatta),英文名rhesus macaque。分類所屬為哺乳綱(Mammalia),靈長目(Primates),人猴猿亞目(Anthopoidea),猴科(Cercopithecidae),狝猴屬(Macaca)。月經(jīng)周期為28(1-4)天,發(fā)情期為11-12個月,懷孕期163天,產(chǎn)仔期3-6個月,胎產(chǎn)仔1-2只,出生重250-380g,哺乳期3-7個月。 狝猴屬中,恒河猴使用最廣。因分子生物學進展,栗色狝猴用于生理、生化、遺傳、血型及免疫等方面的研究更多,病理研究也不少,常用于醫(yī)療和藥物實驗等。 在生物學研究方面可用于生理學、心理學、遺傳學的各種研究。 在生理學研究方面可用于腦功能、血液循環(huán)、呼吸生理、生殖生理、內分泌和老年學等各項實驗。 在醫(yī)學研究方面可用于感染人類所特有的傳染病,特別是其他動物不能的傳染病 藥物學研究方面,預防小兒麻痹的糖丸,恒河猴是唯一的試驗對象 ,人類避孕藥物的研究,用恒河猴作試驗是極為理想的,此外,恒河猴還常用于放射病出血和骨髓移植的實驗。 (一)傳染病學研究 (二)藥理學和毒理學研究 (三)生殖生理研究 (四)口腔醫(yī)學研究 (五)行為學和高級神經(jīng)活動研究 (六)營養(yǎng)、代謝研究 (七)老年病研究 (八)器官移植和眼科研究 (九)內分泌病和畸胎學研究 (十)腫瘤學和環(huán)保研究 20世紀60年代出版的《狝猴文獻錄》中,涉及論文的多達五百余篇;在12種狝猴中,使用栗色狝猴的幾乎占一半;試加分析,解剖文章占半數(shù),生理學和生態(tài)學其次,再次是分類、地理分布、胚胎、進化、遺傳和生化病理各有二十余篇,最少的是古生物和畜養(yǎng)、管理的文章。 |
模型制作方法 | 1、 實驗用病毒:感染毒株為SHIVchn19p4中國恒河猴細胞適應株,TZM-bl細胞檢測病毒感染效價為1.5×104 TCID50/mL。 2、 感染動物:選用體重4-6kg的SPF恒河猴。實驗前體檢無異常,必須排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆轉錄D型病毒(SRV-1,2,5)和猴T淋巴細胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒(SIV)易感性密切相關的4種基因(Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17)篩查結果為陰性。所有感染動物必須在ABSL-3室中進行。 3、 感染方法:猴G0601V和G0602V經(jīng)后肢靜脈感染1ml (1×104 TCID50/ml)病毒。 4、 SHIVchn19p4靜脈感染猴樣品采集和指標測定:在感染前和感染后4、7、9、11、14、18、21、28、35、42、49、56、70、84及120d采集猴靜脈血3ml(EDTA抗凝),用于外周血病毒載量、CD4+細胞絕對數(shù)及總結合抗體滴度測定。 5、 SHIVchn19p4靜脈感染猴血漿病毒載量的測定:提取EDTA抗凝血漿中病毒RNA,使用SYBR Green I 實時熒光定量RT-PCR方法測定血漿病毒載量。 6、 SHIVchn19p4靜脈感染猴外周血CD4+絕對數(shù)測定:CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗體標記EDTA抗凝全血淋巴細胞,流式細胞儀測定CD4+/CD8+比值,并根據(jù)血常規(guī)結果,計算出CD4+T細胞絕對數(shù)。 7、 SHIVchn19p4靜脈感染恒河猴外周血總結合抗體滴度檢測:恒河猴血漿樣品從1:2開始2倍連續(xù)稀釋后,用“人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)”檢測交叉性體液免疫反應,高于Cut-off值的最大血漿稀釋度定義為SHIV特異性總結合抗體滴度 |
動物模型的評價與驗證 | 通過靜脈途徑,病毒直接感染血液中的靶細胞,制備靜脈途徑艾滋病恒河猴感染模型,用于艾滋病研究。 |
保存方式 | |
更多相關 | 動物模型制備 |
證書編號:241520345370
證書編號:CNAS L22006
證書編號:ISO9001-2024001
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