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Prkra小耳小鼠動(dòng)物模型

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間：2025-09-14 15:06:27

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

資源中文名稱	Prkra 小耳小鼠動(dòng)物模型
資源英文名稱
疾病概述	小耳畸形的病因目前還不完全明確，環(huán)境和遺傳因素是目前小耳畸形病因研究的重點(diǎn)。先天性小耳畸形在基因突變致病性研究方面還沒有闡明小耳畸形胚胎發(fā)育的機(jī)制。小耳畸形主要涉及胚胎發(fā)育期間第一和第二鰓弓的異常，主要表型涉及外耳發(fā)育異常。外耳的耳廓是由第一和第二鰓弓的逐漸融合形成的，在發(fā)育過程中第一和第二鰓弓之間是相互作用，兩弓之間的凹槽加深，形成外耳道，從胚胎的起源來分析，外耳的發(fā)育至少在一定程度上是由第一和第二鰓弓通過后腦的部分區(qū)域來介導(dǎo)的，后腦是鰓弓的神經(jīng)嵴細(xì)胞的來源，在后腦的第四段基因突變可以導(dǎo)致外耳的發(fā)育缺陷。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背景信息	Prkra小耳小鼠(B6.Cg-Prkralear)
模型制作方法	1. Prkra小耳小鼠繁殖小鼠飼養(yǎng)條件是按照普通常規(guī)鼠籠飼養(yǎng),每個(gè)籠不超過5只小鼠。繁殖方式：用同窩的1只雄性和1只雌性交配獲得雜合小鼠，飼養(yǎng)到可以生育的成年鼠后,然后雜合與雜合再交配，得到?jīng)]有表型的雜合雌、雄小鼠。 2. Prkra 小耳小鼠的基因點(diǎn)突變檢測(cè) DNA 測(cè)序:設(shè)計(jì)引物進(jìn)行Sanger法測(cè)序，應(yīng)用試劑盒法裂解鼠尾提取DNA，洗脫出的DNA 于-20 ℃ 保存。通過引物3 在線平臺(tái)( http:/ /primer3.ut.ee/ )設(shè)計(jì)候選變異引物，Prkra 正向引物為TTCAGTAGCGAGCCAGCAC,反向引物為ACAACTGTCCGCTCTGTCG。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)反應(yīng)體系:金牌Mix(green)27 μl，正向引物1 μl,反向引物1 μl，模板DNA 1 μl。 Prkra 小耳小鼠野生型(上)、雜合型(中)和純合型(下)的測(cè)序峰圖，突變位點(diǎn)為在2 號(hào)染色體76、643、218 bp(GRCm38)上的G向A的突變,該突變位點(diǎn)位于第3 外顯子之后。
動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)與驗(yàn)證
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