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Prkra小耳小鼠動(dòng)物模型

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發(fā)布時(shí)間：2025-07-25 08:49:03 更新時(shí)間：2025-07-25 08:13:20

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作者：中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測(cè)中心

資源中文名稱	Prkra 小耳小鼠動(dòng)物模型
資源英文名稱
疾病概述	小耳畸形的病因目前還不完全明確，環(huán)境和遺傳因素是目前小耳畸形病因研究的重點(diǎn)。先天性小耳畸形在基因突變致病性研究方面還沒(méi)有闡明小耳畸形胚胎發(fā)育的機(jī)制。小耳畸形主要涉及胚胎發(fā)育期間第一和第二鰓弓的異常，主要表型涉及外耳發(fā)育異常。外耳的耳廓是由第一和第二鰓弓的逐漸融合形成的，在發(fā)育過(guò)程中第一和第二鰓弓之間是相互作用，兩弓之間的凹槽加深，形成外耳道，從胚胎的起源來(lái)分析，外耳的發(fā)育至少在一定程度上是由第一和第二鰓弓通過(guò)后腦的部分區(qū)域來(lái)介導(dǎo)的，后腦是鰓弓的神經(jīng)嵴細(xì)胞的來(lái)源，在后腦的第四段基因突變可以導(dǎo)致外耳的發(fā)育缺陷。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背景信息	Prkra小耳小鼠(B6.Cg-Prkralear)
模型制作方法	1. Prkra小耳小鼠繁殖小鼠飼養(yǎng)條件是按照普通常規(guī)鼠籠飼養(yǎng),每個(gè)籠不超過(guò)5只小鼠。繁殖方式：用同窩的1只雄性和1只雌性交配獲得雜合小鼠，飼養(yǎng)到可以生育的成年鼠后,然后雜合與雜合再交配，得到?jīng)]有表型的雜合雌、雄小鼠。 2. Prkra 小耳小鼠的基因點(diǎn)突變檢測(cè) DNA 測(cè)序:設(shè)計(jì)引物進(jìn)行Sanger法測(cè)序，應(yīng)用試劑盒法裂解鼠尾提取DNA，洗脫出的DNA 于-20 ℃ 保存。通過(guò)引物3 在線平臺(tái)( http:/ /primer3.ut.ee/ )設(shè)計(jì)候選變異引物，Prkra 正向引物為T(mén)TCAGTAGCGAGCCAGCAC,反向引物為ACAACTGTCCGCTCTGTCG。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)反應(yīng)體系:金牌Mix(green)27 μl，正向引物1 μl,反向引物1 μl，模板DNA 1 μl。 Prkra 小耳小鼠野生型(上)、雜合型(中)和純合型(下)的測(cè)序峰圖，突變位點(diǎn)為在2 號(hào)染色體76、643、218 bp(GRCm38)上的G向A的突變,該突變位點(diǎn)位于第3 外顯子之后。
動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)與驗(yàn)證
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