D5F173L轉(zhuǎn)基因多巴胺小鼠模型。

背景品系為C57BL/6小鼠，屬于動物界、脊索動物門、脊椎動物亞門、哺乳綱、嚙齒目、鼠科、家鼠屬、家鼠種的動物，1921年立特(Little)用艾比·拉特洛坡(Abby Lathrop)的小鼠株，雌鼠57號與雄鼠52號交配而得C57BL，1937年從C57BL分離出C57BL/6亞系培育而成。

由美國喬治敦大學(xué)Pedro A. Jose博士惠贈的pcDNA-h-D5F173L表達(dá)載體人D5F173L質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化入大腸桿菌JM109，搖菌擴(kuò)增后測序，測序結(jié)果經(jīng)Blast分析，顯示得到的pcDNA-D5-F173L與Genebank 中序列對比得到目的突變位點正確。用顯微注射法將線性化的轉(zhuǎn)基因載體注射到C57BL小鼠的受精卵中，用C57BL小鼠作假孕受體，制備轉(zhuǎn)基因小鼠。轉(zhuǎn)基因小鼠用堿裂解法提取基因組DNA。PCR法鑒定轉(zhuǎn)基因首建鼠及其子代基因型。Western blot檢測轉(zhuǎn)基因小鼠腎組織中D5R的表達(dá)（圖2）。

                    1        2       3        4       M

圖2 Western Blotting 鑒定D5 F173L轉(zhuǎn)基因小鼠D5受體蛋白在腎臟的表達(dá)

1:野生型對照小鼠，2:32號首建鼠的F1代小鼠，3:4號首建鼠的F1代小鼠，

4:16號首建鼠的F1代小鼠